《表3 自由酶催化制备(R)-1b各参数》

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《"生物催化不对称还原制备(R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙醇研究进展"》

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*浓度按照反应体系的总体积计算.

根据Huisman提出的羰基还原酶工业应用需要达到的指标（表3）评估，一个有价值的羰基还原酶生物催化工艺需要满足底物浓度至少100 g/L，底物/酶量>50，24 h内反应的转化率>95%[10].P1B2催化1a生产（R）-1b时，酶和辅酶NADP+用量较高，底物/酶比率为15；Ch KRED20催化时，粗酶粉浓度为2 g/L，底物1a的浓度为150 g/L，辅酶NAD+的用量为0.2g/L，24 h内可以完全转化底物，因此该酶催化的工艺参数达到工业应用的基本要求[18]（表3）.值得一提的是，Ch KRED20在异丙醇耐受性实验中表现突出，能够在45%-85%(V/V）的异丙醇和底物组成的有机相中保持高活力，且在75%时活力最高[43-44].另外，该酶为NADH依赖型；在pH 6.0～9.0范围内能够保持95%以上活力，最适温度为50℃，在40-60℃内能保持80%的最大酶活力，且在40℃条件下，半失活周期达到163 h；多种金属离子、有机溶剂等对其酶活影响较小[45].该酶还显示了分子改造的潜力，目前获得多个底物谱拓展或者酶活力提高的突变体[43-44，46-47].这些性质都是该酶可进一步开发利用的有利因素.