《表3 引物信息:新疆褐牛和安格斯牛公犊脂代谢相关肉品质性状的比较》

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《新疆褐牛和安格斯牛公犊脂代谢相关肉品质性状的比较》


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注:F:上游引物;Q:下游引物

用Trizol试剂(Invitrogen公司)提取脂肪组织总RNA,基因组消化后用微量分光光度计(NanoDrop公司)测定其浓度,凝胶电泳判断其完整性。质检后按照RNA反转录试剂盒(FastQuant RT,北京天跟生化科技有限公司)操作说明合成cDNA。在NCBI查找牛LEP、FASN、FABP4、HSL和LPL基因mRNA序列,用DNAMAN软件设计由Invitrogen公司合成(表3)。以cDNA为模板按照试剂盒(Applied Biosystems)说明书配制反应体系,经实时荧光定量PCR仪(Applied Biosystems)扩增,扩增条件如下:90℃,10 min,95℃,15 s,60℃,1 min,40个循环。每个样品重复3次,扩增结束用ABI 7500 Fast软件收集CT值并用2-ΔΔCT分析目的基因表达水平,用内参基因β-actin矫正。