《表1 用于扩增的LncRNA的引物序列》

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《外周血LncRNA-ATB和LncRNA-CCAT1检测对非小细胞肺癌诊断价值》

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注：LncRNA-ATB．转化生长因子-β；LncRNA-CCAT1．结肠癌相关转录物1；GAPDH．甘油醛-3-磷酸脱氢酶。

使用qRT-PCR方法，通过LncRNA特异性寡核苷酸引物检测组织和血浆中LncRNA-ATB和LncRNA-CCAT1水平变化。实验前按要求将Power SYBR?Green PCR Master Mix试剂反应液配置完成后，加入合成2μL cDNA、0.5μL特异引物F和0.5μL特异引物R形成混匀物至PCR板。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）作为标准对照，去离子水作为阴性对照，以一式三份的方式分析LncRNA-ATB或LncRNA-CCAT1的表达。热循环95℃预变性15min，95℃循环10s，60℃退火/延伸1min，共40个循环。使用Applied Biosystem SDS软件2.4版计算定量循环荧光值Cq，使用2-ΔΔCq方法计算这2种LncRNA的相对表达水平。特异性引物的序列见表1。