《表1 在大肠杆菌中通过融合表达或共表达系统提高目的蛋白质可溶性表达量或胞外含量》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《提高大肠杆菌表达外源蛋白胞外含量的策略》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

在大肠杆菌中重组蛋白质的过表达可能导致错误折叠的蛋白质积聚成包涵体，而分子伴侣可以有效改善目的蛋白质折叠、溶解性和跨膜运输。在大肠杆菌中表达异源蛋白质并分泌至胞外的前提是该蛋白质以可溶形式产生，否则无法释放出胞外。因此分子伴侣的共表达成为将目的蛋白质有效分泌到胞外的有效方法之一。近年来Takara公司利用此原理开发了几种广泛用于改善蛋白质的可溶性表达的大肠杆菌分子伴侣载体，如pG‐KJE、p Gr07、pKJE7等[7]，其中质粒pG‐KJE8携带两组大肠杆菌的分子伴侣基因gro ES‐gro EL和dna K‐dna J‐grp E。通过双载体共表达——质粒pG‐KJE8和携带人源角膜晶状体蛋白乙醛脱氢酶（Aldehyde dehydroge‐nase 3A1，ALDH3A1）基因的质粒pET‐26b（+）/ALDH3A1，提高了ALDH3A1在大肠杆菌中异源表达的可溶性蛋白质产量[17]。如表1所示，使用分子伴侣GroES/GroEL和DnaK/DnaJ/GrpE的双载体共表达系统（大肠杆菌分子伴侣载体pGKJE3和携带CGTase的基因的质粒pTCGT1）来提升浸麻芽胞杆菌（Bacillus macerans）的环糊精糖基转移酶（Cyclodextrin glycosyltransferase，CGTase）在大肠杆菌中的可溶性表达量[18]。将炽热球菌（Pyrococcus furiosus）的分子伴侣前折叠蛋白质（prefoldin）与炽热球菌的α‐淀粉酶在大肠杆菌中在单或双质粒中共表达都改善了α‐淀粉酶的可溶性表达[19]。