《表2 过表达KsdD的重组大肠杆菌酶活分析》

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《表达KsdD重组大肠杆菌的构建及转化工艺优化》

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为了进一步比较含有目的基因KsdD的重组大肠杆菌的C1，2位脱氢活性差异，本研究采用DCPIP法对重组大肠杆菌中KsdD的酶活进行了测定。结果如表2所示，三种重组大肠杆菌中均检测到KsdD酶活，且过表达KsdDR2的重组大肠杆菌的酶活明显高于KsdDM，而KsdDA的重组大肠杆菌酶活最低，仅为KsdDR2的64.2%，这表明过表达KsdDR2的重组大肠杆菌具有更高的C1，2位脱氢能力。由此可见，Ser138及Tyr122氨基酸残基对KsdD酶的催化活性至关重要，这与实验室前期研究结果相符[12，13]。