《表1 质粒与菌株:重组枯草芽孢杆菌分泌表达缺陷假单胞菌磷酸三酯酶及其发酵优化》

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《重组枯草芽孢杆菌分泌表达缺陷假单胞菌磷酸三酯酶及其发酵优化》


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(1) 菌株、质粒和培养基.本研究所用菌株和质粒及其相关性如表1所示.LB培养基(g/L):蛋白胨10,酵母粉5,氯化钠10,1×105Pa高压蒸汽灭菌20 min,LB固体培养基另加入2%的琼脂粉.枯草芽孢杆菌转化培养基(g/L):spI-a溶液:(NH4)2SO44,K2HPO4·3H2O 28KH2PO412,二水合柠檬酸钠2.0;spI-b溶液:MgSO4·7H2O 0.4;萄糖溶液(w/v):50%无水葡萄糖;100×CAYE溶液:酪蛋白氨基酸20.0,酵母粉100.0;CaCl2溶液50 mmol/L CaCl2;MgCl2溶液:250 mmol/L MgCl2100×EGTA溶液:10 mmol/L EGTA,溶解时用NaOH溶液调节pH至8.0,过滤除菌于-20℃冷藏备用.