《表3 1.0 mmol/L IPTG时不同诱导温度和时间下大肠杆菌中融合蛋白His-TIMP-2表达含量》

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《组织基质金属蛋白酶抑制剂-2的表达纯化及活性鉴定》


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大肠杆菌中融合蛋白的表达含量均采用SDS-PAGE分析,不同诱导温度、不同诱导时间下融合蛋白His-TIMP-2的表达含量见表3。分析比较发现,在特定温度下,融合蛋白含量随诱导时间的增加而增加,例如37℃时,融合蛋白含量从0增加到20.7%。在诱导时间相同时,融合蛋白含量随诱导温度升高而呈增加的趋势,例如诱导4 h,温度从30℃升至42℃时,融合蛋白含量从10.3%增加到23.3%。而且,随着诱导温度的升高,融合蛋白含量达到最大值所需时间缩短,在30℃时,融合蛋白含量的增加趋势在研究范围内未出现平台;37℃时,融合蛋白含量在诱导8 h后基本不变;42℃时,融合蛋白含量在诱导4 h后基本达到最大值。因此,在His-TIMP-2的原核表达中,诱导温度和时间是关键因素。根据上述结果,融合蛋白His-TIMP-2诱导表达的最适条件为37℃诱导8 h或42℃诱导4 h。