《表1 RT-PCR引物序列》

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《穿心莲片对华法林药代动力学的影响及机制研究》

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根据前期研究的结果[12]，选取的药物浓度为10、100μmol·L-1，细胞经不同浓度的药物处理24 h后，用TRIZOL试剂提取细胞总RNA，用紫外分光光度仪测RNA浓度和A260/A280比值，当A260/A280比值在1.7～1.9时，说明样品纯度较高。根据试剂盒说明书将RNA反转录为cDNA，以cDNA作为反应模板，配制反应液进行实验。以GAPDH为内参物，引物由上海生工生物工程有限公司合成，引物序列见表1。凝胶分析采用Bio-Rad凝胶成像分析系统，电泳后对琼脂糖凝胶进行采图并扫描分析，测定电泳条带光密度扫描值；本实验采用GAPDH为内参照，所有基因表达都以GAPDH作均一化处理，目的mRNA条带灰度值与GAPDH mRNA条带灰度值比值表示并分析。