《表2 UL111A基因在AD169感染HFF细胞中的转录本情况》

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《人巨细胞病毒增殖性感染UL111A基因转录本特征及变化》


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为探索不同时间点是否存在不同的UL111A转录本特征变化,首先,我们使用UL111A特异性引物(见图4)PCR检测感染AD169病毒的不同时间点HFF细胞的cDNA,并经测序验证,oLX2-12以及oLX3-13特异性引物扩增的产物显示的2个条带分别为包含第1个内含子和不包含第1个内含子的模式,并且随着时间的增加,剪切第1个内含子模式越来越少。同样的,oLX6-14和oLX6-15特异性引物扩增的产物主要显示包含第2个内含子的模式,在早期12 h或24 h,可见较弱剪切第2内含子条带模式。随后我们以UL111A全长通用引物PCR检测不同时间点感染HFF的cDNA,扩增产物经切胶回收连载体,挑选大量单克隆送测序进一步检测转录本占比的情况,表2显示在感染的各个时间点,未剪切形式转录本皆占比最多,其次为LAcmvIL-10转录本,而cmvIL-10转录本只在感染的早期(24 h)和晚期(9 d)被检测到。