《表1 引物序列、Tm值及PCR产物大小》

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《实时荧光定量PCR鉴定肉制品中牛源性成分及其含量》

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根据美国NCBI GenBank数据库公布的牛线粒体细胞色素b基因序列（登录号MH157891.1），运用Primer Premier5.0软件设计筛选对牛有特异性的PCR扩增引物。由于混合肉制品成分复杂，且实时荧光PCR反应干扰因素多，为保证数据的精确、可靠，采用相对定量法。选择在结构和功能上具高度保守性的16SrDNA作为内参管家基因[3]，根据16SrDNA基因保守序列设计一对内源基因引物。引物交于上海生工生物工程有限公司合成，取适量引物用高压灭菌后的超纯水溶解，配制成10μmol/L的储备液。引物序列、溶解温度值（melting temperature，Tm）与扩增片段大小具体见表1。