《表2 各对引物测得的籼粳稻谷PCR产物大小和Tm值比较》

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《基于叶绿体DNA的籼-粳稻谷(米)SYBR-Green实时荧光PCR鉴定方法的建立》


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对2.1中组合成的12对引物进行SYBR-Green荧光PCR熔解温度Tm值测定,结果如表2所示。表2表明,在12对引物中,籼粳稻的熔解峰的间距较大,且熔解温度Tm值差异最大的是F3R1与F4R1,均为1.5,籼、粳稻Tm值分别为76.50和78.00。图3表明,引物对F4R1的PCR扩增产物电泳条带大小135bp的为cp DNA缺失的籼稻,204 bp为cp DNA不缺失的粳稻,在12对引物中最小,如表2所示,电泳图谱比F3R1扩增产物区分明显、条带清晰,因此,选取F4R1对用于区分籼、粳稻的PCR引物。F4R1引物对的SYBR-Green荧光PCR扩增曲线和溶解曲线见图4(其他11对引物略)。