《表1 引物的名称和序列》

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《阿可拉定对宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移的抑制作用及对SphK1表达的影响》


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Siha和Hela细胞经阿可拉定(0、5、10、15、20及50μmol/L)处理48 h,TRIzol法提取总RNA,操作方法严格按照试剂盒说明书进行。逆转录试剂盒购自TaKaRa公司,按照M‐MLV操作说明书进行,均为RNase‐free操作,合成cDNA。逆转录条件:70℃10 min,42℃1 h,-80℃保存备用。GAPDH作内源性标准化对照,每组样品作3个复孔。扩增条件:95℃10 s,55℃20 s,72℃20 s,75℃5 s,共40个循环。使用2-ΔΔCT(CT为循环阈值)计算方法,计算目的基因SphK1 mRNA的表达水平。重复3次。引物序列见表1。