《表1 癌变和上皮间质转化基因引物名称及序列》

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《华支睾吸虫分泌排泄蛋白对肝癌细胞系HepG2细胞增殖、迁移和上皮间质转化的影响》

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提前将12孔板进行标记，将处于对数期生长的HepG2细胞，以每孔1 mL接种于12孔板内，细胞悬液浓度为3×105/mL。待细胞贴壁后，用200μL无菌枪头延标记的直线下划，贴壁加入PBS缓慢洗涤细胞2次后按1 mL/孔加入含不同浓度Cs ESP，于显微镜下观察并拍照记录0 h细胞划痕情况。之后置于培养箱中，每隔24 h使用显微镜观察和记录细胞划痕愈合情况，共记录4次，对应时间点，计算其相对迁移面积，并做统计分析。1.2.4 RT-qPCR检测癌变相关基因和EMT相关基因将PBS和不同浓度的Cs ESP，分别孵育HepG2细胞24 h，提取细胞总RNA，逆转录后经RT-qPCR检测。按Trizol Reagent说明书提取HepG2细胞总RNA，酶标仪检测其浓度和纯度，用1μg总RNA量进行逆转录合成cDNA。以该cDNA为模板进行荧光定量PCR扩增，GAPDH作为内参物。将反应混合物于CFX96 PCR仪（美国，Bio-Rad公司）上运行，反应条件:95℃2 min，然后95℃1 min，55℃2min，共35个循环。利用2-ΔΔCt计算基因表达水平。基因引物如表1。