《表2 核酸探针序列：自噬基因Beclin1表达在肾癌循环肿瘤细胞上皮-间质转化及肿瘤进展中的作用》

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《自噬基因Beclin1表达在肾癌循环肿瘤细胞上皮-间质转化及肿瘤进展中的作用》

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用蛋白酶消化细胞60min，PBS洗涤3次。加入EMT相关标志物的基因捕获探针（探针序列见表2），在杂交仪中避光杂交3h，置于40℃培养箱中孵育3h，用洗涤液洗涤3次。使用扩增探针杂交，加入预扩增工作液，在40℃培养箱中孵育30min，PBS洗涤液洗涤3次，加入扩增探针工作液，在40℃培养箱中孵育30min，PBS洗涤液洗涤3次，使用标记有荧光基团的标记探针与扩增探针进行杂交，产生荧光信号，加入显色信号探针工作液，置于40℃生化培养箱中，孵育30min，洗涤液洗涤3次。在样本上加抗淬灭剂[含DAPI(4′，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）]。样本放置5min后利用CTCs全自动检测系统阅读荧光信号，自动判断CTCs分型检测结果。