《表4 Wrab18基因VIGS片段特异性扩增引物Table 4 Specific amplification VIGS primers of Wrab18》

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《小麦Wrab18基因在小麦与叶锈菌互作中的功能研究》

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设计Wrab18基因特异性VIGS引物如表4，构建VIGS载体命名为BSMV:Wrab18，酶切线性化α，β，BSMV:00和BSMV:Wrab18后进行体外转录获取病毒RNA，以摩擦接种法接种到7日龄的‘L10’幼苗第1片叶上，参照牛笑南等人的方法[10]，保湿箱暗培养12~14h后置于光照培养箱昼/夜温度为24℃/20℃培养。在第3片叶上接种叶锈菌生理小种260，在接菌后的第24，48，72，96h取接种叶片，剪成1cm长叶段，进行HR染色。HR染色参照祁艳等人[5]方法。对染色后样品进行荧光显微观察，统计50个单侵染点HR面积及吸器母细胞数量。