《表1 GAPDH、TUG1、U6和mi R-132引物序列》
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《长链非编码RNA牛磺酸调节基因1和miR-132的表达与乳腺癌预后的关系》
采用Trizol试剂分别提取乳腺癌组织和癌旁组织总RNA,经逆转录获得cDNA。分别以GAPDH和U6为内参,对TUG1和miR-132进行Real-time PCR检测。逆转录反应体系为1.5μl逆转录缓冲液(10×),0.15μl dNTP(10 mmoL/L),1μl逆转录酶,0.19μl RNase抑制剂,3μl逆转录引物,5μl总RNA,加ddH2O补足15μl,30℃孵育30 min,42℃孵育45 min,80℃孵育5 min。荧光体系为10μl PCR缓冲液(2×),1μl 20×miR-126特异引物和荧光探针,1μl逆转录产物,ddH2O补足20μl,置荧光PCR仪检测。反应条件为:95℃30 s,95℃30 s,60℃1 min,72℃30 s,总共进行45个循环。GAPDH、TUG1、U6和miR-132引物序列如表1所示。
图表编号 | XD00127949700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.02.01 |
作者 | 卢小冬 |
绘制单位 | 江苏省如皋市人民医院普外科 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |