《表1 染发剂质量浓度及PPD含量》

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《5种氧化型染发剂的体外彗星试验研究》

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待细胞生长良好并达到对数生长期后，取细胞悬液离心，去除含血清的培养基，并用不含血清的培养基重悬，将细胞密度调至1.0×105个/mL，每管3 mL分装到离心管。PPD终处理浓度是40、50、100、200、400及800μg/mL。将染发剂（A、B、C、D、E）的I剂与II剂等质量混合后溶解于ddH2O，根据其溶解度确定最高处理浓度，并分别倍比稀释设置5个浓度。每浓度取30μL染发剂与3 mL的细胞悬液混合处理，于37℃水浴孵育1.5 h。染发剂A～E的终处理浓度范围分别是0.31～3.33 mg/mL、0.31～5.02 mg/mL、0.04～1.13mg/mL、0.12～1.95 mg/mL和0.11～1.72 mg/mL。根据表1不同染发剂中PPD含量折算，试验使用PPD剂量范围涵盖不同染发剂中实际PPD质量浓度（1.58～100.40μg/mL）。受试物处理完毕后，分别加入终浓度为0、100和200μmol/mL的DNA断裂剂H2O2，于37℃水浴中作用15 min。处理结束后，离心并收获细胞，将细胞重悬于1 mL PBS，调整细胞密度为3×105个/mL用于彗星电泳。试验平行设置ddH2O溶媒对照组。