《表1 引物序列:电针对胰岛素抵抗肥胖大鼠炎性反应状态和胰岛素敏感性的影响》
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《电针对胰岛素抵抗肥胖大鼠炎性反应状态和胰岛素敏感性的影响》
实时荧光定量PCR法检测脂肪组织炎性反应因子IL-6、TNF-α、MCP-1、IL-10、IL-1βmRNA的含量:取-80℃冰箱中备用的脂肪组织每个样本100 mg,用微量RNA提取试剂盒进行裂解、静置、离心后提取RNA,利用核酸测定仪测定RNA浓度,然后进行热变性、反转录,最后利用实时荧光定量PCR仪进行扩增。扩增条件:95℃预变性1 min;95℃15 s,退火温度15 s,72℃45 s,循环40次。其中退火温度根据各引物说明书中Tm值设定,一般选择Tm值之下5℃左右为退火温度。引物由武汉擎科创新生物科技有限公司设计并合成,引物序列见表1。以β-actin为内参,采用2-△△Ct法计算目的基因的相对表达量。
图表编号 | XD00125719600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.12.25 |
作者 | 黄琪、宋燕娟、于兆民、任加凤、梁凤霞、陈瑞、徐芬 |
绘制单位 | 湖北中医药大学针灸骨伤学院、华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院康复科、湖北中医药大学针灸骨伤学院、华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科、湖北中医药大学针灸骨伤学院、湖北中医药大学针灸骨伤学院、华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科、华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院康复科 |
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