《表1 引物序列：胰岛素治疗对糖尿病大鼠阴茎组织中miR-126、VEGF、eNOS表达的影响》

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《胰岛素治疗对糖尿病大鼠阴茎组织中miR-126、VEGF、eNOS表达的影响》

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注：e NOS：内皮型一氧化氮合酶；VEGF：血管内皮生长因子；GAPDH：甘油醛-3-磷酸脱氢酶

法检测大鼠阴茎海绵体组织中e NOS、VEGF、mi R-126的表达所有引物均由Invierogen公司设计合成。取-80℃冰箱中保存的阴茎海绵体组织研磨至粉末后，使用TRIzo I试剂提取总RNA，以Oligo（d T）18为引物，逆转录m RNA为c DNA。取逆转录产物4μL加入实时荧光定量PCR反应体系。PCR反应条件：50℃2 min，95℃10 min；95℃30 s，60℃30 s，40个循环。e NOS、VEGF以GAPDH作为内参校准基因，mi R-126以U6作为内参校准基因。采用ABI公司的实时荧光定量PCR仪对扩增后的PCR产物进行荧光定量检测，绘制溶解曲线，最终数据以2-△△Ct进行分析，见表1。