《表1 各目的基因正反引物》

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《α-PGM过表达对灵芝多糖发酵的影响》

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以质粒pCAMBIA1301为骨架，对其酶切位点XhoⅠ、PmlⅠ进行双酶切。以所提灵芝总DNA(CTAB法）为模板，PCR扩增各目的基因，包括Pgpd、pgm与Msdh B。其中Pgpd为强启动子，Msdh B由sdh B基因定点突变获得，可编码有萎锈灵抗性（cbxr）的蛋白质[12]，因此将其作为筛选标记。表1为各基因片段引物。将重组质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，筛选正确转化子，大量提取质粒PJW-PGM。