《表1 目的基因和内参基因引物》

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《人正常肝细胞LO2感染HBV后表达CCL22》

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采用Trizol法抽取总RNA。利用核酸蛋白检测仪测定样品的OD230、OD260和OD280，OD260与OD280的比值在1.7至2.0之间，用1%的琼脂糖胶进行电泳检测提取的RNA质量，5S、18S和28S的条带清晰可见。用Takara逆转录试剂盒将提取的总RNA中的mRNA逆转录为cDNA。用南京诺唯赞RT-qPCR试剂盒，在ABI的qPCR仪进行RT-qPCR反应。使用Primer 5.0设计qPCR引物，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，引物序列如表1。将LO2细胞分为两组，一组感染HBV，另一组不感染。使用实时荧光定量PCR测定IL-32的mRNA相对表达量（图1上）；PCR结束后，进行2%的琼脂糖电泳（图1下）。将THP-1细胞分为两组，一组用外源人类重组IL-32蛋白刺激，一组不刺激。使用实时荧光定量PCR测定TNF-α的mRNA相对表达量（图3上）；PCR结束后，进行2%的琼脂糖电泳（图3下）。