《表2 SNAC底物动力学参数》

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《阿维菌素起始酰基转移酶的底物特异性》


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注:ND:未测量出.

为了迚一步比较AveAT0和三突变AveAT0V224M/Q149L/L121M对两种底物MB-SNAC和IB-SNAC的偏好程度,分别测定了以MB-SNAC和IB-SNAC为底物时两个酶的动力学参数(表2)。AveAT0对MB-SNAC的kcat/Km值为32.1 L/(mmol·min),是对IB-SNAC[kcat/Km为7.5 L/(mmol·min)]的4.3倍;而三突变AveAT0V224M/Q149L/L121M对MB-SNAC的kcat/Km值为6.9 L/(mmol·min),是对IB-SNAC为底物[kcat/Km为0.1 L/(mmol·min)]的60多倍。结果显示,三突变AveAT0 V224M/Q149L/L121M对MB-SNAC和IB-SNAC的kcat/Km差异是突变前的10倍以上,对MB-SNAC的偏好性较突变前有提高。