《表1 前脂肪细胞诱导方法的比较》

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《猪脂肪细胞分化及调控研究进展》


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IBMX:1-甲基3-异丁基黄嘌呤;DEX:地塞米松;INX:胰岛素;ASP:促酞化蛋白;FBS:胎牛血清

不同类型的前体脂肪细胞在诱导成脂时,可以使用不同的诱导方法和诱导剂配方,其诱导效率也存在差异(表1)。激素鸡尾酒诱导法(0.5 mmol/L IBMX+1.0μmol/L DEX+10μg/mL INX)是经典的前脂肪细胞诱导方法,其在3T3-L1前脂肪细胞诱导成脂的过程中,诱导效率高达90%以上,有研究发现ASP(50μg/mL)可以替代“鸡尾酒”诱导法中的INX,其诱导效率可达85%(卢慧玲等,2004)。随着研究的深入,更多的优化方法被挖掘出来。有研究报道,在激素鸡尾酒诱导配方中加入罗格列酮,可显著提高3T3-L1前脂肪细胞的分化效率(Vishwanath et al.,2013;赵蕾等,2019)。卢慧玲等(2006)通过对SW872脂肪细胞诱导试验发现油酸分化作用最强,分化效率大于99%,其分化时间和分化效率都优于激素鸡尾酒法,此外IBMX、ASP和胰岛素的单独诱导也可使SW872前脂肪细胞分化,但细胞分化效率低且不均匀,分化后的脂肪细胞虽然体积增大并出现脂滴,但部分细胞仍呈梭形,未形成典型的戒环样结构,且脂滴主要集中在细胞的两端。李昌辉(2012)采用不同诱导方案处理猪的前体脂肪细胞,发现10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)+0.5 mmol/L IBMX+100 nmol/L罗格列酮的诱导培养基诱导细胞转化率最好,其诱导效率可达90%。还有研究在传统“鸡尾酒”方法的基础上通过改变INX的浓度对其进行改良,对比3种诱导剂不同诱导时间对3T3-L1前脂肪细胞系分化的影响,结果表明改良后的诱导剂诱导效率更高,且指出作用时间为3 d时可以提高其转化效率(刘新农等,2016)。在研究过程中,由于细胞类型、细胞活力等因素导致诱导方案和诱导效率的不同,针对不同的细胞种类应选择适宜的诱导剂,同时要保证较好的细胞活力,尽量选择代数较低的细胞进行实验。