《表1 Rti-LAMP引物》

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《牛奶中活沙门氏菌BCAC-EMA-Rti-LAMP快速检测方法的研究》

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沙门氏菌的inv A引物序列具体见表1。Rti-LAMP反应体系总体积为25μL∶2.5μL10×buffer，2.5μL 12.5 mmol/L d NTPs，5μL 25 mmol/L Mg Cl2，2μL 20 mmol/L FIP，2μL 20 mmol/L BIP，0.4μL20 mmol/L F3，0.4μL 20 mmol/L B3，1.2μL 20 mmol/L Loop F，1.2μL 20 mmol/L Loop B，1μL 1∶500稀释的荧光染料Midori Green I，1μL Bst大片段DNA聚合酶，2μL DNA模板，无菌去离子水补足至25μL。制备好的反应管放入BIO-RAD CFX Connect Real-time System内65℃扩增反应60 min，每分钟读取荧光值，设定样品荧光值（超过500）出现指数增加的时间为Tp值（类似于Rti-PCR的Ct值）。Rti-LAMP扩增产物用2%的琼脂糖凝胶电泳检测。