《表1 RT-PCR引物序列》

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《木丹颗粒对高糖环境下人血管内皮细胞Nrf2/ARE信号通路的影响》

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取出人血管内皮细胞，加入1ml Trizol，根据说明提取总RNA，用核酸蛋白分析仪测3组各6份样品的吸光度A，完成RNA的浓度测定，用电泳观察RNA完整性。根据反转录试剂盒说明制备cDNA，备存于4℃温度下。接下来以2×SYBR Green QPCR Master Mix 10μL，RNase Free H2O3.7μL的反应体系进行PCR扩增。反应条件：95℃3min；95℃5s，60℃1min，40个循环。对照荧光染料0.3μL，上游引物2μL，下游引物2μL，反转录产物cDNA 2μL，Primer-BLAST[8]设计引物，引物序列见表1。获取的Ct值根据Pfaffl MW[9]法计算待测目的基因的相对表达量。