《表1 扩增引物序列:TGFBR3错义突变与先天性心脏病遗传关联性研究》

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《TGFBR3错义突变与先天性心脏病遗传关联性研究》


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从HEK293T细胞(中科院典型培养物保藏委员会细胞库)中提取总RNA(中国天根生化科技有限公司总RNA提取试剂盒),反转录得到c DNA(中国天根生化科技有限公司Fast Quant c DNA第一链合成试剂盒),再经PCR反应(扩增引物序列见表1引物1)扩增得到野生型TGFBR3编码序列,克隆到p GEM-T-Easy载体上(美国Promega公司),并通过PCR的方法定点突变获得突变型TGFBR3(点突变引物序列见表1引物2~4)。分别将野生型和突变型TGFBR3编码序列克隆至p CMV6-AC-GFP(美国Origene公司)表达载体。