《表1 Real-time qPCR引物序列》

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《维生素D调控Wnt/β-catenin信号通路抑制乳腺癌干细胞活性》


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常规收集各组细胞,按照TRIzol法提取总RNA,测定RNA浓度,并逆转录合成cDNA,按Real-time qPCR试剂盒说明书配置反应体系。Real-time qPCR反应条件:预变性95℃30 s,1个循环;95℃10 s,60℃30 s,40个循环;95℃15 s,60℃60 s,95℃15 s。引物序列见表1。采用2-△△Ct计算目的基因的相对表达量。△△Ct值=(处理组靶基因Ct值-处理组GAPDH Ct值)-(对照组靶基因Ct值-对照组GAPDH Ct值)。实验重复3次。