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第一部份 光学显微镜制片技术1

引 言1

目 录1

第一章组织的固定3

Ⅰ．细胞的结构3

Ⅱ．固定的基本原则5

一、关于取材6

二、关于固定6

Ⅲ．固定液的性质7

第二章简单固定液10

一、乙醇10

二、甲醛11

三、醋酸12

四、苦味酸13

六、重铬酸钾14

七、氯化汞14

五、铬酸14

八、四氧化锇15

第三章混合固定液17

一、Müller液17

二、Flemming液17

三、Carnoy液18

四、Altmann液18

五、Zenker液19

七、Bouin液20

六、Orth液20

八、Helly液21

九、Stieve液22

十、Aoyama液23

十一、Houseby液23

十二、Gilson液24

十三、Danchakoff液24

十四、Champy液24

十六、Bensley液25

十七、Feulgen液25

十五、Lovdowsky液25

十八、Locour液26

十九、Susa液（Heidenhain）26

二十、Susa液26

二十一、Hermann液27

二十二、乙醇－甲醛固定液（A.F.）27

二十三、Gomori 1-2-3液27

二十六、Hermann液28

二十七、Sanfelice液28

二十五、Dafano液28

二十四、Bouin-Duboscq液28

二十八、Rossman液29

二十九、Tellyesniczky Formal-Alcohol液29

三十、Methacarn液29

第四章脱钙法30

一、脱钙过程30

二、脱钙液31

三、脱钙兼固定方法33

四、脱钙兼脱水方法34

第五章组织脱水35

一、脱水35

二、脱水剂35

第六章透明38

第七章组织块的包埋过程39

一、石蜡包埋法39

二、石蜡快速包埋法42

三、火棉胶包埋法42

四、明胶包埋法43

五、甲基丙烯酸酯包埋法45

六、GMA和Quetol 523包埋法46

第八章切片法48

一、石蜡切片法48

二、火棉胶切片法49

三、冰冻切片法50

第九章组织切片的染色51

Ⅰ．染色剂51

Ⅲ．细胞核的染色方法54

Ⅱ．细胞质的染色方法54

一、苏木精染液染色法55

二、Unna碱性甲烯蓝染液染色法64

三、Unna-Papenhein染液染色法65

四、Thomas染液染色法65

五、Feulgen染液染色法66

六、Breinl三色染液染色法68

七、Hermann藏红－结晶紫染液染色法69

八、Mayer乙醇胭脂红染液染色法70

九、Greracher明矾胭脂红染液染色法71

十、Baker结晶紫染液染色法71

十一、Glegg,Clermont和Leblond过碘酸染液染色法72

十二、比士麦棕染液染色法73

十三、Schneider酸性胭脂红染液染色法73

十四、Darrow红染液染色法73

十五、Thionin-methyl green染液染色法74

Ⅳ．高尔基体的染色方法75

一、Romón y Cajal硝酸铀染液染色法75

十六、Pyronin-methyl green染液染色法75

二、Da Fano硝酸钴－硝酸银染液染色法76

三、Aoyama氯化镉－甲醛染液染色法77

四、Mann-Kopsch 升汞－锇酸染色法78

五、Baker染色法79

六、Beam染色法79

七、Sevringhaus染色法80

八、Moliner改良法82

二、Bensley染色法83

一、Altmann复红苦味酸染色法83

Ⅴ．线粒体的染色方法83

三、Regaud染色法84

四、Bensley-Cowdry酸性复红－甲绿染色法85

五、Hetherington品蓝染色法86

六、Champy-Kul！三色染色法87

七、Benda染色法88

八、苯胺复红－碘绿染色法89

九、Short acid-Fuchsin染色法90

二、苏丹Ⅳ染色法91

Ⅵ．脂肪的染色方法91

一、苏丹Ⅲ染色法91

三、尼罗蓝染色法92

四、Leach苏丹黑B染色法92

五、苏丹黑染色法93

六、苏丹黑－乙二醇染色法94

第十章 儿种重要器官的组织的染色方法96

Ⅰ．肝脏96

一、Mallory苯胺蓝染色法96

二、Heidenhain偶氮胭脂红染色法97

三、碱性复红染色法98

四、Hortega碳酸银染色法——肝内胆小管的染色99

Ⅱ．胰脏99

一、Bensley中性结晶紫染色法100

二、Bloom胰岛细胞染色法101

Ⅲ．消化道102

一、Masson硝酸银染色法102

二、Hoecke-Sebruyns胃腺细胞鉴别染色法103

Ⅳ．甲状腺104

Ⅴ．脑下垂体105

一、Severinghaus染色法106

二、Kresazan垂体细胞鉴别染色法107

Ⅵ．神经组织108

一、神经细胞核染色法109

二、神经轴染色法111

三、神经髓鞘染色法114

四、神经胶质染色法117

五、神经末梢123

六、大脑髓磷脂染色法128

七、松果体染色法129

Ⅶ．肌肉组织130

一、Masson三色染色法131

二、Best胭脂红染色法132

第十一章血液标本的制备134

一、推制血膜方法134

二、血涂片的染色方法135

三、网织红细胞染色方法138

第十二章骨髓标本的制备140

一、涂片法140

二、切片法140

第二部份 电子显微镜超薄切片技术142

第十三章 电子显微镜超薄切片标本的制备142

Ⅰ．固定142

Ⅱ．固定液的配制145

一、四氧化锇固定液145

二、戊二醛固定液149

三、多聚甲醛固定液151

四、高锰酸钾固定液152

五、高锰酸钠固定液153

六、高锰酸镧固定液154

七、丙烯醛固定液154

八、混合固定液154

一、胚胎的固定方法157

Ⅲ．浸渍固定157

二、神经组织的固定方法158

三、精细胞的固定方法158

四、精子的固定方法159

五、皮肤的固定方法160

六、肝组织的固定方法160

七、心肌的固定方法161

八、游离细胞的固定方法161

九、单层培养细胞的固定方法162

十一、绿藻的固定方法163

十、肥大细胞的固定方法163

十二、细菌的固定方法Ⅰ（锇酸固定法）164

十三、细菌的固定方法Ⅱ（戊二醛－锇酸固定）165

Ⅳ．分离细胞和细胞器的固定165

一、分离肝细胞的固定165

二、细胞核的固定166

三、染色体的固定Ⅰ167

四、染色体的固定Ⅱ168

五、高尔基体的固定169

六、微粒体的固定Ⅰ（从胰脏分离总微粒体）170

七、微粒体的固定Ⅱ171

第十四章脱水173

第十五章包埋176

一、浸透176

二、包埋剂176

三、环氧树脂包埋剂178

四、环氧树脂的室温包埋法188

五、环氧树脂的快速包埋法188

六、聚脂树脂包埋剂189

七、水溶性环氧树脂包埋剂192

八、甲基丙烯酸酯包埋剂194

九、水溶性甲基丙烯酸酯包埋剂195

第十六章超薄切片197

一、切片刀的制作197

二、刀槽的制作200

三、修理组织块202

四、切片刀及组织块的装置203

五、厚切片205

六、超薄切片207

第十七章染色216

一、铅染色217

二、铀染色222

三、其他染液224

第十八章厚切片的染色233

一、溶脱环氧树脂的溶剂233

二、不脱环氧树脂的切片染色法235

三、脱去树脂后染色法240

第十九章支持膜的制备244

一、火棉胶膜的制备244

二、Formvar膜的制备245

三、碳膜的制备247

四、塑料基底碳膜的制备247

第三部份光学显微镜放射自显影技术249

第二十章 光学显微镜放射自显影249

Ⅰ．引言249

一、硬组织放射自显影标本的制备251

Ⅱ．大体放射自显影的制备251

二、整个小动物的切片及放射自显影标本的制备252

三、自显过程（即“曝光”）253

四、显影和定影253

五、大体放射自显影标本制备应注意之点254

六、封片254

Ⅲ．液态乳胶放射自显影的制备254

一、组织的制备254

三、核子乳胶的应用257

二、核子乳胶的选择257

四、自显过程259

五、显影和定影259

六、“后染”260

Ⅳ．剥落胶片法261

一、组织的制备261

二、乳胶膜的应用262

三、自显过程263

五、染色264

四、显影和定影264

Ⅴ、接触法265

一、生物材料的制备265

二、核子乳胶板的应用265

三、显影和定影265

四、结果的观察266

Ⅵ．贴附法266

一、湿贴法266

二、干贴法267

三、显影和定影267

四、染色268

Ⅶ．涂片法268

Ⅷ．培养细胞的放射自显影制备方法268

一、单层培养细胞的制备269

二、培养细胞的切片法270

Ⅸ．组织块离体标记的放射自显影制备方法270

第二十一章 电子显微镜放射自显影272

Ⅰ．引言272

第四部份电子显微镜放射自显影技术272

Ⅱ．电子显微镜放射自显影的基本原理274

一、核子乳胶的一般特性274

二、核子乳胶对带电粒子的反应275

Ⅲ．雾点的产生及其消除方法279

第二十二章灵敏度和分辨率281

一、灵敏度281

二、分辨率283

第二十三章 电子显微镜放射自显影标本的制备292

一、放射性同位素的应用293

二、生物材料的处理301

第二十四章核子乳胶膜的制备304

一、对乳胶膜的要求304

二、单层乳胶膜的制备305

第二十五章 自显过程和显影过程312

一、自显过程的条件312

二、显影过程313

三、标本的最后处理319

附录323

一、缓冲液的配制323

二、各种动物所需的生理盐水331

三、几种生理盐水的配制331

四、几种常用生物染料的光谱吸收333

五、细胞核染色剂（碱性染料）333

六、细胞质染色剂（酸性染料）334

九、甲基绿的提纯方法335

八、活体染色剂335

七、脂肪染色剂335

十、中性甲醛的配制336

十一、封片剂336

十二、光学显微镜切片中几种药剂的脱除方法337

十三、电子显微镜常用的生物材料包埋剂339

十四、载玻片的洗涤方法341

十五、长度、重量及容量342

参考文献343

名词对照349