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第一章组织培养方法1

一、人皮肤成纤维细胞的培养方法1

二、人外周血淋巴细胞短期培养技术3

三、人羊水细胞培养及染色体标本的制备6

四、支持细胞的分离与培养8

五、组织块与组织块的遭遇培养11

六、细胞系与组织块的遭遇培养12

七、琼脂培养法13

八、血管壁平滑肌细胞和内皮细胞的培养15

九、大鼠腺垂体细胞培养方法20

十、神经细胞的分散培养22

十一、人羊水细胞大量增殖培养及绒毛细胞培养技术25

十二、培养细胞的电特性测定技术30

十三、细胞骨架的光镜制样法35

十四、建立永久性类淋巴母细胞样细胞系方法37

第二章器官培养方法39

一、灌流式器官培养法39

二、琼脂小岛器官培养法41

三、鸡胚尿囊绒膜培养法42

五、滤纸虹吸培养44

四、早期鸡胚胚盘培养法44

六、摇摆式器官培养46

七、网格法器官培养47

八、鸡胚上颌突上皮和间充质重组实验49

第三章培养细胞增殖动力学的常用分析方法52

一、生长曲线的绘制52

二、分裂指数测定53

三、成集落实验53

四、人体和哺乳动物细胞同步化方法54

五、缩时显微电影拍摄技术55

六、人类肿瘤集落形成检测与药敏实验56

第四章化学诱变及转化实验60

一、诱导哺乳动物细胞次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶位点正向突变的实验方法60

二、人白血病HL-60细胞系HGPRT缺失突变型细胞株的分离和建立62

三、用N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍在体外诱发金仓鼠乳鼠肺细胞的恶性转化68

四、DNA介导的基因转移72

第五章培养细胞的药物、放射敏感性及杀伤试验76

一、人癌细胞系对抗癌药物的敏感性试验76

二、细胞培养的加温实验78

三、细胞培养的X线照射试验79

四、细胞培养的微波照射试验80

五、高温-光动力效应研究81

六、LAK细胞的制备及其肿瘤细胞的杀伤试验83

七、MTT测定85

第六章染色体技术88

一、小动物骨髓细胞染色体标本制作方法88

二、人类皮肤成纤维细胞染色体标本制作方法90

三、人实体瘤的细胞遗传学分析91

四、哺乳动物细胞减数分裂标本的简易制作方法92

五、成熟前聚集染色体标本制作方法93

六、染色体Q带显带法95

七、BSG-C显带(C带)技术96

八、核仁组织区(NORs)Ag-AS二步镀银法97

九、人类高分辨染色体技术98

十、姊妹染色单体差别染色方法100

十一、小动物体内显示SCE方法101

十二、显示人体X染色体脆性位点的方法102

十三、人类体细胞间期核内性染色质显示方法103

十四、动物细胞染色体扫描电镜标本制备方法105

十五、细胞中DNA的定量测定方法107

十六、染色体分带技术——G带109

十七、X小体显示法111

十八、一种改良的Y小体显示法113

十九、染色体原位杂交技术115

二十、染色体R显带方法119

二十一、人类精液的减数分裂相直接制备技术121

二十二、用低渗处理来检测人类精子膜功能完整性的方法122

第七章同工酶技术124

一、同工酶的凝胶分离技术124

二、用醋酸纤维素薄膜电泳法测定培养的动物细胞中的乳酸脱氢酶同工酶131

三、LDH、G6PD同工酶分离技术133

四、胶原的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳136

五、高活性L-谷氨酸脱氢酶的制备138

六、培养内皮细胞的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术141

第八章单克隆抗体技术145

一、人绒毛膜促性腺激素(hCG)单克隆抗体的制备149

第九章放射性自显技术及液闪测定技术152

一、培养细胞的同位素自显术152

二、器官培养的同位素自显术154

三、整体动物的放射性同位素自显术156

四、同位素双标记技术157

五、染色体放射自显影标本制备方法158

六、同位素液闪测定159

七、原位杂交技术162

八、放射受体结合测定法169

九、非放射性标记检测体系173

十、组织和血液细胞内环核苷酸水平的放射免疫分析法178

十一、淬灭校正的内标准源法180

十二、睾丸生精细胞动力学及蛋白质代谢放射自显影技术181

十三、非同位素染色体原位杂交技术182

十四、同位素液丙法检测程序外DNA合成186

十五、DNA合成抑制试验188

十六、DNA修复试验190

十七、碱性洗脱荧光法检测DNA单链断裂和DNA蛋白质交联试验192

第十章细胞化学染色法194

一、培养细胞的活体染色方法194

二、定量细胞化学技术——显微分光光度计吸收测量法195

三、免疫细胞化学技术198

四、免疫荧光染色技术的应用206

五、单细胞悬液染色标本的多信息分析法——流式细胞光度术209

六、苦味酸天狼星红——偏振光法213

七、生物素—抗生物素蛋白体系过氧化物酶染色法215

八、生物素—抗生物素蛋白体系DCS间接免疫荧光法218

九、哺乳类精子细胞嗜银结构的显示技术220

十、小鼠精子头部银染异常的检测方法222

十一、用纤维蛋白自显影系列鉴定内皮细胞释放的PA和PAI223

第十一章电镜技术225

一、扫描电子显微镜的生物学标本制作技术225

二、培养细胞透射电子显微镜标本制备技术227

三、冷冻蚀刻电镜技术236

四、快速HE冰冻切片Sheehan染色法239

五、扫描隧道显微镜及其生物学应用240

六、一种观察核基质-中间纤维的简易整装电镜制样法248

七、细胞核骨架制备技术250

第十二章细胞和细胞器及间质的分离技术252

一、细胞的分离252

二、微粒体的分离与纯化256

三、细胞核的分离256

四、溶酶体的分离257

五、鼠肝微粒体酶的制备方法258

六、染色体的分离方法260

七、DNA的分离与纯化262

八、从培养哺乳动物细胞中分离DNA的方法263

九、纤维连接蛋白的提取264

十、层粘连接蛋白的提取266

十一、碱洗脱荧光法检测细胞DNA交联性损伤268

十二、弹性蛋白的分离提取270

十三、胶原蛋白的分离提取271

十四、人类和哺乳动物细胞同步化方法273

十五、细胞及亚细胞组分分离技术275

十六、细胞膜的分离技术279

十七、线粒体的制备281

十八、大鼠肝染色质小分子多肽的提取283

十九、小鼠线粒体DNA的快速制备方法287

二十、从组织与培养的细胞中分离RNA的方法288

第十三章体外受精技术291

一、异种体外受精方法291

二、同种体外受精方法293

三、人精子单倍体染色体制作法294

四、人精子冷冻保存技术295

五、精子细胞生物学技术296

第十四章早期鸡胚的实验胚胎学技术307

一、早期鸡胚原结的胚内诱导实验307

二、早期鸡胚原结的离体诱导实验308

三、胚胎冷冻保存技术310

第十五章核酸分子杂交及电泳技术316

一、核酸分子杂交术316

二、蛋白质的双向电泳321

三、糖胺聚糖的提取及醋酸纤维素膜电泳法324

四、原位缺口移位技术328

五、聚合酶链反应(PCR)技术332

六、PCR技术在法医学中的应用336

七、DNA指纹(DNA fingerprinting)分析技术343

八、基因文库的建立及用减除杂交法筛选基因文库348

第十六章实验动物遗传监测技术351

一、小鼠遗传纯度的快速鉴定——尾部植皮法351

二、大鼠品系定型血清的制备353

三、微量淋巴细胞毒实验354

四、近交系小鼠、大鼠的生化基因标志的鉴别355

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