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目 录1

第一篇 电子显微镜的原理和使用1

第一章绪论1

第二章电子显微镜的基本原理4

第一节光学显微镜的分辨极限4

第二节电子显微镜的理论基础6

第三节电子与固体样品的相互作用11

第三章透射电子显微镜的结构、原理和使用13

第一节透射电镜的结构13

第二节透射电镜的成像原理21

第三节透射电镜的使用与调整23

第四章扫描电子显微镜的结构、原理和使用27

第一节扫描电镜的结构27

第二节扫描电镜的工作原理31

第三节扫描电镜的使用34

第四节扫描透射电镜36

第一节 X射线显微分析的基本原理38

第五章X射线显微分析技术38

第二节X射线显微分析仪41

第三节分析方法及应用45

第二篇 电子显微镜生物样品制备技术48

第六章超薄切片技术48

第一节载网和支持膜48

第二节超薄切片的制作52

第二节负染样品的制备68

第一节负染的原理68

第七章负染色技术68

第三节负染色液70

第四节负染的操作方法71

第五节负染色中应注意的问题71

第八章金属投影和复型技术76

第一节金属投影技术76

第二节复型技术80

第九章扫描电子显微镜的生物样品制备技术83

第一节扫描电镜样品制备的基本方法83

第二节样品的制备与观察90

第十章电子显微镜的冷冻制样技术93

第一节冷冻固定原理及其方法94

第二节冷冻干燥技术97

第三节冷冻取代技术98

第四节冷冻超薄切片技术98

第五节冷冻断裂复型技术102

第六节冷冻制样的安全规则104

第一节未标记特异抗体与悬浮态抗原的直接作用106

第十一章免疫电子显微镜技术106

第二节标记抗体与悬浮态或组织内抗原的作用108

第三节免疫电镜技术的应用112

第十二章 电子显微镜细胞化学技术113

第一节酶的细胞化学技术113

第二节其他生化物质的细胞化学技术120

第十三章电子显微镜放射自显影技术123

第一节基本原理123

第二节放射自显影样品的制备127

第三节电子显微镜放射自显影图像分析131

第四节放射性的防护132

第十四章生物大分子电子显微镜技术135

第一节蛋白质分子的电镜样品制备135

第二节核酸分子的电镜样品制备137

第三篇实验技术143

第十五章基础实验143

实验一样品支持膜的制备143

实验二样品包埋块的制作144

实验三修块、超薄切片和染色145

实验四病毒样品的负染色147

实验五金属投影技术148

实验六复型技术150

实验七扫描电镜样品常规制备技术151

实验八冷冻超薄切片155

实验九冷冻断裂复型159

实验十抗原抗体直接免疫反应的电镜样品制备技术161

实验十一免疫胶体金对组织细胞内抗原的标记染色定位研究162

实验十二免疫胶体金对悬浮态样品的标记染色163

实验十三酸性磷酸酶的细胞化学技术164

实验十四电镜放射自显影技术164

实验十五DNA的蛋白质单分子展层技术166

第十六章应用实例169

一、培养细胞超薄切片的制作169

二、木材超薄切片的制作169

三、纸张超薄切片制作170

四、植物原生质体超薄切片的制作171

五、细菌的包埋171

六、真菌菌丝及孢子的包埋171

七、线虫的固定172

八、藻类固定172

九、原生动物固定173

十、孢子的固定173

十一、酵母的固定174

十二、精细胞和精子的固定174

十四、Hela细胞的固定175

十三、卵母细胞和卵的固定175

十五、植物组织的一些特殊固定方法176

十六、显示微管和微丝的固定177

十七、感染病毒的植物组织固定177

十八、浮游单细胞藻类的琼脂平板制备178

十九、病毒的提纯178

二十、兔瘟病毒的提纯180

二十一、浓缩病毒悬液的方法181

二十二、昆虫病毒的提纯181

二十四、增加超薄切片反差的铅—铀—铅染色法183

二十三、负染碳膜法制备病毒结晶状排列的样品183

二十五、超薄切片的铀—铅—铜选择性染色法184

二十六、金藻鳞片花纹的TEM观察184

二十七、造纸填料、颜料和胶料的制备184

二十八、天然橡胶与塑料共混相容性的电镜观察185

二十九、免疫胶体金溶液的制备186

三十、芜菁花叶病毒的免疫电镜观察188

三十一、亚细胞钙离子定位的锑酸盐沉淀技术188

三十三、细胞色素氧化酶的定位189

三十二、三磷酸腺苷酶（ATPase）的定位189

三十四、过氧化物酶的定位190

三十五、过氧化氢酶的定位190

三十六、葡萄糖－6－磷酸的定位191

三十七、显示碱性蛋白的氨银反应191

三十八、显示DNA的孚尔根——六亚甲四胺银染色法192

三十九、染色质核小体的透射电镜样品制备192

四十、手工分离细胞核DNA的展开法193

四十一、电镜图像的立体对照片制作和观察193

四十二、小麦草纤维细胞木素分布情况的能谱测定194

四十三、原生质体的扫描电镜观察196

四十四、薰蒸固定真菌的扫描电镜观察196

四十五、线虫扫描电镜样品的制备197

四十六、池塘底泥中轮虫冬卵的扫描电镜观察197

四十七、大豆染色体的扫描电镜观察197

四十八、花粉表面形态的扫描电镜观察198

四十九、SPA菌体免疫电镜法检测兔瘟病毒198

五十、病毒血凝性的扫描电镜观察198

五十二、植物材料的冷冻割断扫描电镜样品制备199

五十一、血细胞E花环电镜样品制备与观察199

五十三、酵母菌苯乙烯割断扫描电镜观察200

五十四、扫描电镜观察土壤有机—无机复合体及微团聚体的方法200

五十五、肾结石的扫描电镜观察201

五十六、扫描电镜观察石蜡切片的方法201

五十七、扫描电镜连续观察长毛发的方法201

五十八、微小血管的扫描电镜制备方法201

五十九、鱼类耳石日轮超微结构的扫描电镜观察202

六十、木材立方体扫描样品制备技术202

六十一、扫描电镜样品的四氧化锇—硫卡巴肼导电染色法（OTOTO法）203

六十二、扫描电镜样品的鞣酸—四氧化锇导电染色法（TAO法）203

六十三、减压蒸馏法提纯戊二醛204

六十四、免疫酶标记技术对杂交瘤细胞内免疫球蛋白分布的研究204

六十五、免疫铁蛋白标记技术对烟草蚀纹病毒TEV及其细胞内含体的研究205

名词对照207

参考文献215

图版说明221