《现代分子生物学实验技术 第2版》求取 ⇩

目录1

1.绪论1

1.1分子生物学与基因工程一瞥1

1.1.1Watson和Crick的DNA模板学说1

1.1.2Monod和Jacob的操纵子学说4

1.1.3基因工程的工具酶和载体5

1.1.4基因工程的基本程序6

1.2基因工程与分子生物学进展一览7

1.2.1基因工程的研究成就7

1.2.2分子生物学的研究成就26

1.3基因工程与分子生物学的发展趋势及展望40

1.3.1蛋白质工程:改造基因、改造蛋白质、改造生命40

1.3.2分子生物电子学的兴起以及不同学科的相互渗透41

1.3.3走向海洋,走向宇宙空间42

1.3.4大规模深入研究的重大战略部署43

1.4不结束语44

2.分子生物学实验室常规仪器设备46

2.1实验室的基本要求46

2.2.2水的净化装置47

2.2实验室的常规仪器及设施47

2.2.1温度控制系统47

2.2.3消毒设备48

2.2.4计量系统48

2.2.5其它设备49

2.3离心机室的装备50

2.4分析仪器室的设置50

2.4.1电泳装置50

2.4.2层析装置52

2.4.5DNA合成仪54

2.4.6DNA测定仪54

2.4.3光密度仪54

2.4.4真空印迹系统54

2.4.7PCR仪55

2.5核素实验室56

2.5.1放射性核素操作实验室56

2.5.2放射性核素测定室57

2.6细胞培养室57

2.6.2温育和贮存区58

2.6.1无菌操作设施58

2.6.3观察和研究室59

2.6.4清洗和消毒59

2.7暗室59

2.8冷室60

3.分子生物学实验室常用技术61

3.1核酸的纯化61

3.1.1酚/氯仿抽提核酸溶液的制备61

3.1.2酚的重蒸馏与水饱和62

3.2.2丁醇抽提浓缩法63

3.2核酸的浓缩63

3.2.1固体聚乙二醇(PEG)吸水浓缩法63

3.3核酸的沉淀64

3.3.1核酸沉淀的盐类及浓度64

3.3.2核酸沉淀的温度与时间65

3.3.3离心力与离心时间66

3.3.4有机沉淀剂66

3.3.5核酸沉淀的操作方法66

3.4.2荧光分光光度法测定核酸浓度69

3.4.1分光光度法测定核酸的浓度69

3.4核酸的定量69

3.5核酸的贮存70

3.6限制性内切酶及其应用71

3.6.1限制性内切酶的功能、分类及命名71

3.6.2限制性内切酶的数量单位及质量控制72

3.6.3限制性内切酶酶解体系的建立73

3.6.4限制性内切酶酶解中常见的问题和解决措施75

3.6.5限制性内切酶的星号活力77

3.6.6限制性内切酶的底物位点优势效应77

3.6.7琼脂糖包埋完整染色体DNA的内切酶酶解78

3.6.8限制性内切酶对单链DNA的切割79

3.6.9限制性内切酶位点上的甲基化79

3.7电泳80

3.7.1原理80

3.7.2影响电泳动率的四大因素80

3.7.3核酸电泳的指示剂与染色剂83

3.7.4电泳装置85

3.7.5聚丙烯酰胺凝胶电泳85

3.7.6琼脂糖凝胶电泳88

3.7.7脉冲场凝胶电泳92

3.7.8双相电泳93

3.8超速离心分离技术94

3.8.1离心分离物质的原理94

3.8.2超速离心的分类95

3.8.3超速离心在核酸分离中的应用96

3.9柱层析97

3.9.1排阻层析98

3.9.3羟基磷灰石柱层析99

3.9.4离子交换层析99

3.9.2亲和层析99

3.9.5反相层析100

4.核酸的分离与纯化101

4.1核酸分离提取的原则101

4.2真核细胞染色体DNA的制备102

4.3质粒和噬菌体DNA的提取与纯化109

4.3.1质粒DNA的提取与纯化109

4.3.2质粒DNA的小量制备111

4.3.3质粒DNA的大量制备115

4.3.4质粒DNA的纯化117

4.3.5噬菌体DNA的提取与纯化121

4.4DNA片段的分离及纯化126

4.4.1从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的原则126

4.4.2DEAE纤维素纸插片电泳法127

4.4.3电泳洗脱法128

4.4.4低熔点琼脂糖凝胶挖块回收法132

4.4.5玻璃粉末洗脱法133

4.4.6琼脂糖凝胶中回收DNA片段的纯化134

4.4.7聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段135

4.5RNA的分离与纯化(真核细胞RNA的制备)136

4.4.8蔗糖梯度超速离心分离DNA片段136

4.5.1创造一个无RNase的环境137

4.5.2RNA的提取方法139

4.5.3mRNA的分离与纯化149

5.核酸分子探针的标记155

5.1概述155

5.1.1探针的种类及其选择155

5.1.2各种标记物及其选择159

5.1.3放射性核素的探测161

5.1.5各种标记方法及其选择162

5.1.4放射性核素的卫生防护162

5.2.1切口平移法163

5.2探针的放射性核素标记法163

5.2.2随机引物法166

5.2.3单链DNA探针的标记169

5.2.4cDNA探针的标记171

5.2.5RNA探针的制备与标记173

5.2.6DNA探针的末端标记176

5.2.7寡核苷酸探针的标记185

5.3非放射性标记法186

5.2.8碘放射性核素标记法186

5.3.1酶促标记法187

5.3.2化学标记法187

5.4探针的纯化191

5.4.1凝胶过滤柱层析法191

5.4.2反相柱层析法192

5.4.3乙醇沉淀法193

5.5探针比放射活性的测定193

5.5.1三氯乙酸沉淀法193

5.5.2DE-81滤膜吸咐法194

6.核酸分子杂交195

6.1膜上印迹杂交195

6.1.1印迹技术195

6.1.2固-液相杂交技术207

6.1.3杂交信号的检测213

6.1.4滤膜的重复使用217

6.2液相杂交技术217

6.2.1核酸酶S1保护分析法217

6.2.2RNA酶保护分析法219

6.3核酸原位杂交及其应用220

6.3.1核酸原位杂交的基本原理220

6.3.2核酸原位杂交的基本操作方法224

6.4新技术简介230

6.4.1亲和捕捉法230

6.4.2夹心杂交法230

6.4.3链取代法231

7.基因克隆技术233

7.1基因工程诞生的历史背景233

7.2.1通过建立基因库分离靶基因234

7.2基因克隆的策略与技术路线234

7.2.2通过载体在适当宿主中扩增235

7.3目的基因的来源与产生235

7.4基因克隆的载体236

7.4.1质粒载体236

7.4.2λ噬菌体载体241

7.4.3粘粒245

7.4.4丝状噬菌体载体249

7.4.5真核细胞的克隆载体251

7.5DNA分子的体外连接256

7.5.1DNA连接酶及连接机制256

7.5.2DNA浓度对连接产物构型的影响259

7.5.3DNA分子连接的策略与方案262

7.5.4一种快速DNA连接技术276

7.6重组子导入受体细胞277

7.6.1概述277

7.6.2转化方法278

7.7.1针对遗传表型改变筛选法282

7.7重组子的筛选与鉴定282

7.7.2分析重组子结构特征的筛选法284

7.8亚克隆技术287

7.9高效率感受态细胞的制备290

7.9.1感受态细胞制备的影响因素291

7.9.2高效率感受态细胞制备方法292

8.基因组文库295

8.1构建基因组文库的载体295

8.2.2几种λ噬菌体载体296

8.2.1应用λ噬菌体构建基因组文库的基本步骤296

8.2λ噬菌体载体296

8.3载体DNA的制备302

8.3.1载体DNA的酶解302

8.3.2酶切后载体的再连接及包装后的滴度检测303

8.3.3载体臂的纯化303

8.3.4载体的脱磷处理305

8.3.5LamdaGEMll/LamdaGEM12BamHI.XhoI酶切后载体臂的部分填充305

8.4真核细胞DNA的制备306

8.4.1几种染色体DNA的提取方法306

8.4.2限制性内切酶部分酶解高分子量真核DNA308

8.5.1连接浓度310

8.5连接和包装310

8.5.2连接条件的确定312

8.5.3包装抽提物的制备和体外包装313

8.6基因组文库的保存和扩增316

8.7粘性质粒为载体的基因组文库317

9.cDNA文库319

9.1概述319

9.1.1mRNA的分离319

9.1.4cDNA与载体连接320

9.1.2cDNA第一链的合成320

9.1.3cDNA第二链的合成320

9.1.5噬菌体的包装、转染及质粒DNA的转化322

9.2cDNA库的构建323

9.2.1mRNA分离323

9.2.2第一链的合成324

9.2.3第二链的合成324

9.2.4cDNA的甲基化325

9.2.5cDNA与连接子的连接325

9.2.7cDNA的克隆326

9.2.6cDNA的分部分离326

9.2.8计算克隆效率327

9.2.9cDNA库的扩增327

10.DNA序列测定329

10.1概述329

10.1.1末端终止法329

10.1.2化学裂解法331

10.2末端终止法测定DNA核苷酸序列331

10.2.1末端终止法所需的关键试剂331

10.2.3大片段待测DNA片段的定向连续次级克隆332

10.2.2末端终止法测定DNA序列方法的选择332

10.2.4用噬菌体M13克隆待测DNA片段337

10.2.5双脱氧末端终止法339

10.2.6变性聚丙烯酰胺凝胶制备343

10.2.7测序产物的凝胶电泳344

10.2.8TaqDNA聚合酶催化的测序反应及凝胶的银染色法344

10.3Maxam-Gilbert化学法测定DNA序列347

10.3.1待测DNA的纯化347

10.3.2碱基的特异性修饰及裂解348

10.3.3测序图谱的识读350

11.2.1ALFexpressTM全自动激光荧光核酸测序仪352

11.2自动测序仪及操作原理352

11.DNA序列的自动测定352

11.1概述352

11.2.2ABI最新型全自动DNA测序仪354

11.2.3ABIPRISM310型全自动DNA测序仪(遗传分析仪)354

11.3自动测序操作程序354

11.3.1载体系统354

11.3.2模板DNA的制备359

11.3.3测序胶的制备362

11.3.4测序模板DNA聚合酶延伸反应363

11.3.6核苷酸顺序的阅读364

11.3.5样品上样和电泳364

11.3.7测序全程常见问题和解决办法365

12.外源基因在原核细胞中的表达367

12.1原核生物基因表达的特点367

12.2外源基因在原核细胞中表达的重要调控元件368

12.2.1启动子368

12.2.2SD序列371

12.2.3终止子371

12.3.1非融合型表达蛋白载体pKK223-3372

12.3几种类型的原核表达载体372

12.3.2分泌型克隆表达载体PINⅢ系统373

12.3.3融合蛋白表达载体pGEX系统373

12.4用于原核细胞表达的外源基因374

12.5提高外源基因表达水平的措施375

12.5.1提高翻译水平376

12.5.2减轻细胞的代谢负荷,提高外源基因的表达水平376

12.5.3提高表达蛋白的稳定性,防止其降解377

12.6关于包涵体378

12.7有关的实验379

12.7.1外源基因的诱导表达379

12.7.2细菌的裂解380

12.7.3包涵体的分离381

12.7.4包涵体的溶解和复性381

12.8蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳382

12.9表达产物的免疫学及生物活性的检测386

13.1.1胸苷激酶基因(tk)选择系统388

13.1.2二氢叶酸还原酶基因(dhfr)选择系统388

13.1哺乳动物基因转移的遗传选择标记388

13.外源基因在真核细胞中的表达388

13.1.3新霉素抗性选择系统389

13.1.4氯霉素乙酰转移酶基因检测系统389

13.2外源基因导入哺乳动物细胞的载体389

13.2.1SV40载体389

13.2.2其它病毒载体391

13.3.1磷酸钙转染技术392

13.3外源DNA导入哺乳动物细胞的方法392

13.3.2电穿孔转染技术394

13.3.3基因显微注射技术395

13.3.4脂质体载体法395

13.3.5DEAE-葡聚糖转染技术396

13.4基因表达产物的检测397

13.4.1免疫荧光抗体法检测表达蛋白397

13.4.2免疫沉淀法检测表达蛋白398

13.4.3Western印迹检测表达蛋白质400

14.1.2甘油冻存法404

14.1.1固体斜面法404

14.1菌种保藏404

14.基因工程菌的大规模培养404

14.1.3冷冻干燥法405

14.2工程菌培养405

14.2.1影响工程菌生长和产物合成的因素405

14.2.2工程菌培养方法408

14.2.3参数检测与控制408

14.2.4工程菌培养设备—发酵罐及其控制系统409

14.2.5工程菌培养过程410

14.3.1菌密度的测定413

14.3工程菌培养中的主要分析方法413

14.3.2发酵液中葡萄糖浓度的测定414

14.3.3发酵液乙酸浓度的测定415

15.工程菌生产的蛋白的复性与纯化417

15.1包涵体的制备和溶解417

15.2变性蛋白的纯化418

15.3蛋白复性418

15.3.1影响蛋白复性的因素418

15.3.2蛋白复性方法419

15.4蛋白复性的检测方法420

15.4.2凝胶高压液相色谱法421

15.4.1反相高压液相色谱法421

15.4.3细胞测活法422

15.5蛋白纯化423

15.5.1蛋白纯化的方法423

15.5.2蛋白纯化的操作方法425

15.5.3层析柱的清洗427

15.6蛋白含量测定427

15.6.2Lowry法428

15.6.3BCA法428

15.6.1紫外分光光度法428

16.动物细胞的大规模培养430

16.1培养细胞的特性430

16.1.1培养细胞的生长方式及类型430

16.1.2培养细胞的生长特点430

16.1.3培养细胞的生长过程431

16.2培养细胞生长的条件433

16.2.1细胞的营养需要433

16.2.2细胞的生存环境434

16.3.2培基的配制435

16.3.1细胞培基和血清的选择435

16.2.3无污染及无毒435

16.3细胞培养的基本技术435

16.3.3其他常用液体的配制437

16.3.4原代培养439

16.3.5传代培养和细胞系的维持440

16.3.6细胞克隆441

16.3.7细胞计数443

16.3.8细胞的冻存与复苏444

16.3.9细胞培养的污染及检测446

16.4.1细胞培养规模的放大451

16.4动物细胞大规模培养451

16.4.2动物细胞培养生物反应器452

16.4.3动物细胞微载体培养452

16.4.4生物反应器的操作454

17.多聚酶链式反应(PCR)技术458

17.1PCR技术的原理458

17.2PCR反应的成分和作用459

17.2.1PCR反应的缓冲液459

17.2.2底物(脱氧核糖核苷三磷酸,dNTPs)浓度459

17.2.6PCR反应的产物积累规律460

17.2.5PCR反应条件的选择460

17.2.3PCR反应的酶及其浓度460

17.2.4引物460

17.3PCR反应的自动化461

17.4PCR反应引物设计461

17.5耐热DNA聚和酶462

17.6PCR反应模板的准备464

17.7几种特殊的PCR465

17.7.1锚定PCR465

17.7.4多重PCR466

17.7.3反向PCR466

17.7.2不对称PCR466

17.7.5着色互补PCR467

17.8PCR技术的应用467

17.8.1遗传性疾病的基因诊断467

17.8.2PCR反应在检测艾滋病中的应用471

17.8.3检测癌基因473

17.8.4PCR在法医学上的应用475

17.8.5PCR技术在分子生物学中的其它应用477

18.DNA的化学合成483

18.1DNA化学合成原理485

18.2DNA的合成、纯化及鉴定486

18.2.1DNA合成仪的操作486

18.2.2DNA的切落及去保护487

18.2.3寡核苷酸片段的纯化487

18.2.4寡核苷酸片段的鉴定488

18.2.5合成产物中DNA含量的测定488

18.3DNA化学合成的应用488

18.3.1DNA合成在基因工程和分子生物学研究中的应用489

18.3.2DNA合成在基因表达和调控方面的应用490

18.3.3合成基因在医学中的应用491

19.多肽的固相合成493

19.1多肽合成原理493

19.1.1液相多肽合成的简介493

19.1.2固相多肽合成的简介494

19.2固相多肽合成495

19.2.1固相多肽合成的策略495

19.2.2缩合反应501

19.2.3反应的监测502

19.2.4脱保护503

19.2.5合成中应注意的问题504

19.2.6肽从树脂上的裂解505

19.2.7粗肽的纯化506

19.3环肽的简介506

19.4固相多肽合成507

19.4.1实验材料507

19.4.2第一个氨基酸与树脂的连接507

19.4.3肽在树脂上的合成509

19.4.4肽从树脂上的裂解515

19.4.5脱盐520

19.4.6纯化520

19.4.7分析技术521

19.5结束语524

20.蛋白质氨基酸组成及序列测定525

20.1蛋白质及肽的氨基酸组成分析525

20.1.1实验前的准备:蛋白质水解525

20.1.2氨基酸的测定526

20.2.1蛋白质(肽链)的选择性裂解528

20.2蛋白质N末端氨基酸序列测定528

20.2.2肽段的分离、纯化529

20.2.3肽段氨基酸顺序测定529

21.真核基因表达调控533

21.1真核基因表达调控基本理论533

21.1.1真核基因结构功能特点533

21.1.2真核基因表达调控的策略534

21.1.3转录前的表达调控534

21.1.4转录水平的调控538

21.1.5转录后水平的调控547

21.1.6翻译水平的调控549

21.1.7翻译后水平的调控550

21.2基因表达调控研究方法550

21.2.1DNaseⅠ超敏感性分析551

21.2.2DNA甲基化分析551

21.2.3转录起始位点的测定(引物延伸法)553

21.2.4体外转录554

21.2.5进行中的核转录分析557

21.2.6差示文库558

21.2.7氯霉素乙酰转移酶分析560

21.2.8凝胶滞留法563

21.2.9滤膜结合法566

21.2.10Southwestern印迹567

21.2.11足纹法572

21.2.12蛋白-核酸紫外交联法588

21.2.13DNA结合蛋白的分离纯化590

21.2.14编码DNA结合蛋白的cDNA克隆的筛选592

22.转基因动物597

22.1转基因方法597

22.2.1DNA影响基因转移的因素598

22.2显微注射DNA的制备与纯化598

22.2.2显微注射DNA样品的制备599

22.3鼠的种类与饲养600

22.3.1鼠的种类600

22.3.2鼠的安置与饲养601

22.4超排卵与取卵601

22.4.1超排卵601

22.4.2取卵602

22.5.1制备持卵管与注射针604

22.5显微注射604

22.5.2显微注射操作605

22.6卵的转移607

22.6.1输卵管转移607

22.6.2子宫移卵608

22.7转基因鼠系的建立609

22.7.1取鼠胚胎609

22.7.3转基因鼠中外源DNA的分析610

22.7.4转基因鼠系610

22.7.2从胎鼠肌肉或幼鼠尾巴提取大分子量DNA610

22.8卵培养液的配制与保存611

22.8.1配制M2与M16的培养液的贮存液611

22.8.2由贮存液配制M2612

22.8.3由贮存液配制M16612

22.9转基因动物的应用612

22.9.1基因表达调控612

22.9.2转基因动物模型616

22.9.3用转基因动物生产生物活性物质与药物617

23.1.1植物转基因基本技术618

23.1转基因植物的基本技术与方法618

23.转基因植物618

23.1.2植物转基因方法619

23.1.3根癌农杆菌Ti质粒表达载体619

23.1.4植物组织培养和培养基619

23.2.2原生质体的制备622

23.2.3原生质体的转染622

23.2.4报告基因产物的分析622

23.2.1烟草悬浮细胞的培养622

23.2PEG介导的原生质体转染622

23.3根癌农杆菌介导的叶盘转化法623

23.3.1烟草无菌苗的培养623

23.3.2根癌农杆菌感受态的制备及其转化623

23.3.3烟草叶盘共培养624

23.3.4转化植株的筛选624

23.3.5转化植株的田间移栽624

23.4基因枪法转化愈伤组织624

23.4.5水稻转化细胞的筛选625

23.4.4轰击625

23.4.6植株再生625

23.4.2金粉制备625

23.4.3微弹(microcarrier)制备625

23.4.1水稻愈伤组织的诱导与培养625

23.5病毒载体表达系统626

23.5.1病毒cDNA的克隆和外源基因的插入628

23.5.2体外转录629

23.5.3重组病毒的小量制备629

23.5.4病毒的大量繁殖和提纯629

23.6转基因植株的分析629

24.人类基因治疗631

24.1基因治疗概述631

24.2基因转移系统632

24.2.1反转录病毒632

24.2.2腺病毒633

24.2.3腺病毒伴随病毒634

24.2.4单纯疱疹病毒634

24.3.1造血细胞635

24.3受体细胞与转移基因的表达635

24.2.5脂质体635

24.2.6受体介导的蛋白635

24.3.2肌肉细胞636

24.3.3成纤维细胞636

24.3.4肝细胞637

24.3.5其它细胞637

24.4人类基因治疗的审批程序638

24.5基因标记与基因治疗638

24.6.1腺苷脱氨酶缺陷639

24.6遗传病基因治疗639

24.6.2血友病640

24.7肿瘤基因治疗641

24.8伦理学安全性与社会效应641

24.9问题与展望642

25.体内外基因转移方法645

25.1体内外基因转移方法概述645

25.2体内外基因转移方法实例645

26.1.2穿刺方法650

26.1.1粒子轰击(基因枪)-RNA疫苗650

26.非病毒载体基因治疗650

26.1完全非病毒的基因转移方式650

26.1.3超声介导的转染方法651

26.1.4脂质体介导的大脑内连续转移基因651

26.1.5DNA-合成蛋白(肽)复合物651

26.1.6哺乳动物人工染色体652

26.1.7厌氧细菌-梭状芽胞杆菌在癌症基因治疗中的应用652

26.1.8抗体作为酶或基因的载体652

26.2.2多瘤病毒的假衣壳作为载体653

26.2.3噬菌体显示肽定向转移基因653

26.2.1腺病毒的核内体溶解653

26.2病毒增强的基因转移方式653

27.细胞凋亡的研究方法656

27.1细胞凋亡的形态学检测方法656

27.1.1凋亡细胞的显微镜观察656

27.1.2凋亡细胞的姬姆萨染色656

27.1.3凋亡细胞的电子显微镜观察657

27.1.4凋亡细胞的碘化丙啶(PI)排斥分析法657

27.1.5双苯并咪唑染料(Hoechest33342)活细胞吸收分析法658

27.1.6凋亡细胞对胰蛋白酶和脱氧核糖核酸酶敏感性分析法659

27.2.1细胞群染色体DNA断裂的测定Ⅰ660

27.2细胞凋亡的生物化学研究方法660

27.2.2染色体DNA断裂的测定Ⅱ661

27.2.3同时分析凋亡细胞染色体DNA断裂及其细胞形态法661

27.2.4大分子染色体DNA断裂的测定663

27.2.5细胞凋亡时钙离子浓度的测定664

27.3细胞凋亡的免疫化学分析方法666

27.4细胞凋亡的分子生物学研究方法668

27.4.1过氧化物酶标记测定法668

27.4.2荧光素标记测定法670

27.4.3生物素-dUTP/酶标亲和素测定法672

27.4.4Cy5-dCTP直接荧光标记法673

28.微卫星技术677

28.1微卫星技术概述677

28.1.1概念677

28.1.2微卫星技术基本特征677

28.1.3微卫星产生机制677

28.1.4微卫星标记的筛选677

28.2.1扩增片段长度多态性678

28.2微卫星多态标记检测技术678

28.2.2荧光标记PCR法-采用373ADNA序列荧光标记自动分析仪680

38.3统计分析681

28.3.1不同人群之间等位基因频率计算681

28.3.2人群中Hardy-Weinberg平衡推算681

28.3.3推算突变率681

29.cDNA末端快速扩增技术683

29.1RACE的原理683

29.2RACE的方法684

29.3RACE的改良和优化687

29.3.1反转录688

29.3.2加尾反应688

29.3.3PCR扩增和PCR产物的克隆691

29.4RACE的其它应用及其前景692

30.mRNA差异显示法694

30.1mRNA差异显示法原理694

30.2mRNA差异显示技术694

31.DNA芯片技术698

31.1DNA芯片的制作原理698

31.2.1基因诊断699

31.2.2应用DNA芯片技术分析基因组及发现新基因699

31.2DNA芯片的应用699

31.2.3DNA芯片用于基因表达的研究700

31.2.4利用DNA芯片进行DNA序列分析700

31.2.5利用DNA芯片技术进行后基因组研究700

32.常用遗传统计分析方法702

32.1Hardy-Weinberg定律702

32.1.1常染色体基因的Hardy-Weinberg定律702

32.1.2X-连锁基因的H-W定律702

32.1.3近亲婚配和Hardy-Weinberg定律703

32.2.1遗传多态性704

32.2多态性704

32.2.2基因频率707

32.2.3样本取样随机性的验证707

32.2.4多态性信息量计算707

32.3多态性连锁分析708

32.3.1连锁分析708

32.3.2连锁相-单体型与重组709

32.3.3连锁不平衡711

32.4优势对数计分法与计算机程序711

32.5关联分析715

32.6传递不平衡检验716

32.6.1只有一个孩子受累的家庭716

32.6.2有两个孩子患病的家庭717

32.6.3有两个以上受累同胞的家庭717

32.7等位基因共享分析718

32.7.1受累同胞对分析719

32.7.2不一致同胞对720

32.7.3受累亲属对分析720

1.常用限制性内切酶酶切位点722

附录722

2.放射性核素数据725

3.离心机转速与离心力的换算726

4.核酸及蛋白质数据727

5.分子克隆中使用的试剂与常用缓冲液的配制733

6.常用贮存液的配制740

7.常用酶的配制745

8.常用层析数据747

9.细菌培养基、抗生素和菌株750

英汉分子生物学词汇761

索引801

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