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第1篇 基因工程和蛋白质工程1

第1章 基因工程的分子生物学基础1

1.1 遗传信息传递的方向--中心法则1

1.2 DNA的复制2

1.3 DNA聚合酶3

1.4 原核和真核生物基因结构的特征6

1.5 RNA的转录和RNA的加工7

1.6 逆转录和逆转录酶18

1.7 翻译--蛋白质的生物合成18

1.8 基因表达调控33

第2章 基因工程的四大要素及实施要点49

2.1 基因工程操作中常用的工具酶49

2.2 基因的分离53

2.3 基因工程载体60

2.4 受体细胞和重组基因的导入70

2.5 基因重组的方法71

2.6 基因重组体的筛迭74

第3章 与基因工程相关的一些理论和技术问题79

3.1 外源基因在宿主细胞中的高效表达79

3.2 基因的融合和融合蛋白的表达83

3.3 外源蛋白的分泌表达86

3.4 关于重组蛋白的正确折叠及修饰90

3.5 几种产生基因突变的方法93

3.6 DNA序列分析98

3.7 基因的修饰及其对表达的影响101

第4章 蛋白质工程概述110

第5章 基因工程和蛋白质工程的进展113

5.1 COS细胞瞬时表达系统及其应用113

5.2 哺乳动物细胞稳定表达系统116

5.3 核型多角体病毒为载体的昆虫表达系统119

5.4 噬菌体显示技术(phage display)124

5.5 粒子轰击和基因转移126

5.6 同源重组与基因寻靶128

5.7 关于转基因动物131

5.8 聚合酶链式反应及其应用进展132

5.9 几种有开发前景的研究135

第2篇 酶工程139

第1章 酶工程概述139

1.1 定义及特点139

1.2 范围139

第2章 酶的来源及酶反应的特点140

2.1 酶的来源及微生物作为酶源的优越性140

2.2 酶的分类及其基本作用原理146

3.1 酶的抽提150

第3章 酶的分离纯化及纯度鉴定技术150

3.2 用于生化物质分离的沉淀技术153

3.3 各种分离纯化技术的基本理论依据156

3.4 凝胶过滤156

3.5 吸附层析166

3.6 离子交换层析168

3.7 高效液相色谱(HPLC)175

3.8 亲和层析180

3.9 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)188

3.10 等电聚焦(IEF)194

3.11 几种其它的聚丙烯酰胺凝胶电泳218

3.12 印迹转移电泳220

3.13 各种分离纯化技术的顺序及衔接222

4.2 固定经技术223

第4章 固定经技术223

4.1 固定经技术的发展史223

4.3 固定经技术的新进展225

4.4 生物传感器为酶工程开拓了新的发展领域227

第5章 多酶反应器232

5.1 意义232

5.2 多酶反应器的设计目标和要求232

5.3 使用多酶反应器时的一些注意事项232

第6章 化学修饰及蛋白质工程等新技术为酶的开发和改造提供的新途径234

6.1 酶的化学修饰234

6.2 基因工程技术为酶的生产提供新途径234

6.3 蛋白质工程技术为酶的定向改造提供新手段235

第7章 酶工程发展的现状和展望236

1.1 抗体的概念239

1.2 抗体形成的理论239

第1章 抗体产生的机理239

第3篇 细胞工程239

1.3 免疫球蛋白的分子结构241

1.4 免疫球蛋白的基因片段243

1.5 免疫球蛋白的基因结构243

1.6 抗体多样性的基因基础245

1.7 抗体多样性的细胞学基础248

1.8 抗体制备技术的发展249

第2章 细胞工程抗体262

2.1 小鼠体系262

2.2 融合前的准备工作263

2.3 细胞融合268

2.4 融合后的管理280

第3章 人单克隆抗体的制备288

3.1 制备人单抗的技术路线289

3.2 人源抗体制备中的难点及新技术方法297

第4章 单克隆抗体在肿瘤治疗中的应用306

4.1 单克隆抗体在体外的应用306

4.2 单克隆抗体在体内的应用308

附录：杂交瘤单克隆抗体技术311

(一)融合前的准备工作311

(二)B细胞融合技术313

(三)融合后的管理工作316

第4篇 发酵工程及其进展325

第1章 概述325

1.1 历史回顾325

1.2 生物技术的发展使发酵工业进入了新时期326

2.1 菌种分离、筛先的原则与步骤328

第2章 优良菌种的选育328

2.2 产生特珠物质的微生物筛选331

2.3 自然选育334

2.4 诱变育种335

第3章 代谢调控和代谢工程340

3.1 代谢调控340

3.2 代谢工程348

第4章 发酵与产物分离偶联354

4.1 发酵与产物分离偶联的基础354

4.2 偶联技术的应用356

第5章 发酵过程的优化与控制366

5.1 发酵过程的测量366

5.2 发酵过程模型化369

5.3 发酵过程控制372