《表4 氨基酸分析梯度洗脱程序》

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《生脉注射液化学物质基础研究(Ⅰ)——化学成分的定性分析》

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采用高效离子交换色谱-柱后衍生化技术分析生脉注射液中结合及游离氨基酸种类[15]。色谱条件:色谱柱:日立2622 SC阳离子交换树脂分析柱（4.6 mm×60 mm），采用5种缓冲液梯度洗脱，缓冲液配比和洗脱程序分别见表3，4。洗脱液流速0.28 mL·min-1，茚三酮显色剂柱后衍生显色，显色剂流速0.32 mL·min-1，检测波长:570，440 nm（针对脯氨酸和羟脯氨酸）。供试品溶液的制备:游离氨基酸:精密量取本品2 mL于25 mL量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，即得；水解氨基酸:精密量取本品2 mL于具塞硬质玻璃水解管中，加6mol·L-1盐酸10 mL，于110℃烘箱中连续水解22h，取出，放冷，转移入25 mL量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗涤液并入同一量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。测定法:精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液各10μL，进样测定。结果表明，7批生脉注射液均含门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、脯氨酸等17种氨基酸，游离氨基酸和水解氨基酸的种类基本一致。水解氨基酸总量约为游离氨基酸总量的3倍（表5），提示本品中部分氨基酸以多肽的形式存在。