《表1 mdr1a、mdr1b与mrp-1、mrp-2、mrp-4、mrp-5 m RNA引物序列》

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《冰片配伍黄芪甲苷与三七总皂苷对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障转运蛋白的影响》

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取患侧视交叉后2～6 mm脑组织30 mg，Trizol液提取总RNA，检测纯度。以RNA按照试剂盒说明书逆转录成c DNA，以此为模板进行PCR扩增，各基因引物序列见表1。反应体系总体积20μL，SYBR Green qPCR Super Mix-UDG 10μL，上、下游引物各1μL（浓度均为10μmol/L），c DNA 1μL，补水至20μL。扩增程序:95℃、3 min，95℃、15 s，58℃、30 s，共39个循环，65℃、5 s，95℃、5 s。4℃保存。各孔设置2个复孔，分析各孔的Ct阈值。采用2-ΔΔCt法计算RNA的相对表达量。每个样本重复3次，以验证结果的可靠性。