《表1 聚合物接枝CRL中α-螺旋和β-折叠含量》

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《聚合物接枝脂肪酶的合成及其对酶活的影响》

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利用CD光谱仪和荧光分光光度计表征了聚合物接枝对CRL分子结构的影响[29]。结果如图3（b）所示。从中可以看出，野生型CRL在208 nm处有一个最大的负峰，其对应于CRL分子的α-螺旋结构。这一结果与其他课题组的报道相吻合[30-31]。众所周知，CRL的催化中心被由α-螺旋构成的“盖子”结构所覆盖[18，32]。从晶体结构（pdb ID.:1CRL）中也可清晰地看出，CRL分子包含了多个α-螺旋结构[33]。聚合物接枝并没有显著改变CRL特征峰的位置。图3（b）显示，四种聚合物接枝CRL(HEMA-g-CRL、n PMA-g-CRL、BMA-g-CRL和GMA-g-CRL）的最大特征（负）峰均出现在205～208 nm之间，其意味着聚合物接枝过程未带来CRL分子二级结构的破坏。本文利用CD光谱分析软件BestSel计算得到野生型CRL及四种聚合物接枝CRL分子中α-螺旋和β-折叠含量，如表1所示。结果表明，野生型CRL的α-螺旋和β-折叠含量依次为0.299和0.173。这与Li等[34]报道的CRL的CD结果一致。HEMA-gCRL、n PMA-g-CRL和BMA-g-CRL分子中α-螺旋含量升高；与之相反，GMA-g-CRL分子的α-螺旋含量则降低至0.211。这种α-螺旋含量的下降可能与此前所述的GMA侧链上环氧基团与CRL分子中氨基酸侧链活性基团的反应相关。与此同时，聚合物接枝导致CRL分子的β-折叠含量增加。CD结果说明聚合物接枝CRL保持了基本的二级结构。