《表2 聚合物接枝CRL相对活性及动力学参数》

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《聚合物接枝脂肪酶的合成及其对酶活的影响》

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进一步考察了聚合物接枝对CRL动力学行为的影响，结果如表2所示。从中可以看出，HEMA-g-CRL具有与游离CRL相近的Km值，但随着单体化合物烷基含碳量的提高聚合物接枝CRL的Km值由0.17 mmol·L-1降至0.09 mmol·L-1，其反映出底物p-NPP与CRL亲和性的提升。这一情况也发生在高分子量聚羧酸甜菜碱偶联的CT对N-琥珀酰-丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸酰苯氨底物的催化中[36]。聚合物接枝CRL中底物亲和性增大归功于CRL表面疏水性的提高。伴随着单体化合物烷基链长度（C2～C4）增加，聚合物接枝CRL的疏水性增强，由此促进疏水性的底物p-NPP与酶的结合。此外，本文研究结果也显示，GMA-g-CRL具有与BMA-g-CRL相同的Km值，但其催化反应速率常数远小于后者。这主要归因于两者之间分子结构的差异。接枝过程中GMA的环氧基团（图1）可通过与CRL分子表面的氨基反应，导致接枝聚合物分子链结构的改变，由此影响到CRL分子结构和酶促反应速率。这一现象也反映在GMA-g-CRL具有比BMA-g-CRL更紧密的分子结构[图3（a）]和更低的α-螺旋含量（表1）。