《表3 尖海龙单倍型序列BLAST比对》

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《尖海龙商品调查与《中国药典》中海龙的基原考证》


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除2个样品测序失败外,所有尖海龙类商品药材使用COI通用引物扩增后经双向测序、拼接、对齐后均获得649 bp的DNA序列。36批市售药材和7批馆藏标本(2批扩增失败)共获得15种COI单倍型序列,经BLASTn分析均与舒氏海龙S.schlegeli具有最优匹配,一致性均超过99%,使用NCBI数据库或BOLD Systems v4数据库进行比对其结果均一致(表3),中国食品药品检定研究院购买的对照药材COI序列BLASTn结果也与舒氏海龙S.schlegeli具有最优匹配,一致性为100%。构建的系统发育树结果表明,使用COI片段进行区分,舒氏海龙S.schlegeli和尖海龙可以分为明显的两支,所有获得的单倍型序列均与舒氏海龙S.schlegeli聚为一支,表明所采集的商品药材可能均来源于舒氏海龙S.schlegeli(图1)。该结果表明从不同来源收集到的所有标为尖海龙的商品药源均为舒氏海龙S.schlegeli,也包括从传统认为是尖海龙分布区的山东、辽宁等地采集的样品。从大连采集的2批海龙属样品(批号20180614007A,20180614007B)测序获得2种单倍型序列,经BLASTn分析均与尖海龙S.acus具有最优匹配,一致性均为99%。