《表1 引物列表:花器官发育B类基因AP3同源基因在几种葫芦科植物单性花发育过程中的作用研究》
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《花器官发育B类基因AP3同源基因在几种葫芦科植物单性花发育过程中的作用研究》
注:粗体字标明软件预测的MADS家族蛋白结合序列。
合成单链DNA探针后,根据3′生物素标记试剂盒(Thermo#89818)说明书步骤将生物素标记加在探针3′端。将互补单链探针退火得到含有生物素标记的双链DNA探针。未加生物素标记的互补单链探针退火作为竞争抑制探针。退火步骤为将互补单链探针溶于TEN缓冲液(10 mmol·L-1 Tris base,1 mmol·L-1 EDTA,50 mmol·L-1 NaCl,pH 8.0),摩尔比混合后,放于浮漂上,静置于沸水中,直至沸水冷却至25℃。根据凝胶阻滞实验试剂盒(Light Shift Chemiluminescent EMSA Kit,Thermo#20148)使用手册进行EMSA试验。蛋白和探针于室温结合反应30 min,后续流程按试剂盒说明书进行。使用的探针DNA序列列于表1。
图表编号 | XD0081731100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.08.25 |
作者 | 蔡广华、路洪凤、黄三文、孙进京 |
绘制单位 | 西北农林科技大学园艺学院、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、中国农业科学院深圳农业基因组研究所、中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |