《表1 不同固定化方法的比较》

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《DA-F127水凝胶包埋固定化含腈水合酶细胞》

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海藻酸钙和聚丙烯酰胺是用来固定化含腈水合酶细胞的两种常用材料，κ-卡拉胶[14]及琼脂[15]包埋法也是固定化细胞常用的方法。使用海藻酸钙、聚丙烯酰胺、κ-卡拉胶DA-F127、琼脂和DA-F127这5种材料包埋固定化含腈水合酶重组E.coli细胞，比较5种方法的固定化酶活回收及重复使用批次，表1中结果表明，用DA-F127固定化细胞，酶活回收率高于其他4种固定化方法，强度也较好。用以上5种固定化细胞完成批次反应，批次反应情况见图1。海藻酸钙固定化方法在前两批的重复使用中较稳定，转化率达98%以上，但随后转化率出现明显下降，可能在反应后期存在细胞泄露的情况，导致批次转化率快速下降。使用聚丙烯酰胺、κ-卡拉胶和琼脂包埋的固定化细胞，在批次重复反应中表现较差，仅使用两个批次后转化率就有较大下降，不适合作为固定化重组E.coli细胞的材料。DA-F127固定化方法在批次反应中，反应批次最多，且酶活回收率相对较好，因此我们选择DA-F127作为固定化细胞的材料。