《表5 接种菌液OD600浓度的优化》

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《茭白人工孕茭体系的建立及优化》


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接种菌株:性亲和菌株UET1和UET2混合菌液;苗龄:薹管萌发后10 d的野生菰幼苗;培育条件:温室环境下,光照12 h,25℃;黑暗12 h,22℃

基于上述的侵染结果得知,用菌液注射野生菰幼苗的方法可以成功侵染野生菰,由于OD600值为2.0的菌液在注射野生菰幼苗后,仍然会导致较高的死亡率,因此在这基础上调整接种菌液的浓度,明确最低的接种浓度和最高的成活率,本研究设置了4个浓度梯度,OD600值为2.0,1.5,1.0,0.5,并以水为对照,按材料与方法中的菌液获取的方法,用超纯水稀释菌体后调整至不同的OD600值后,对薹管萌发后10 d的野生菰幼苗进行接种,激光共聚焦结果表明,在接种3 d后的叶鞘组织,OD600值为2.0、1.5和1.0的菌液接种的幼苗,在叶鞘中都有观察到菌丝生长,在茎尖部位,能观察到菌丝从叶鞘向茎尖扩散,表明前期侵染成功,而OD600值为0.5的菌液接种的幼苗在叶鞘及茎部均未观察到明显的菌丝侵染迹象,可以推测出该处理并不能成功侵染野生菰。OD600值为2.0,1.5,1.0的菌液接种的幼苗接种3个月后的孕茭率分别为(79.4±4.1)%,(29.4±4.2) %,(7.6±2.4) %,然而对接种后10 d不同处理的成活率统计结果表明,所有4个处理间的成活率都趋于一致(表5),由此可以推测,幼苗致死的原因可能是苗龄太小造成。