《表4 茎基部接种法的优化》

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《茭白人工孕茭体系的建立及优化》

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接种菌株:OD600值为2.0性亲和菌株UET1和UET2混合菌液；苗龄:薹管萌发后10 d的野生菰幼苗；培育条件:温室环境下，光照12 h，25℃；黑暗12 h，22℃

本研究发现注射茎基部并浸泡伤口，能100%实现茭白孕茭，但成活率较低。因此进一步对茎基部接种的方法进行优化，选用OD600值为2.0性亲和菌株UET1和UET2混合菌液，对薹管萌发后10 d的幼苗进行接种，分为茎基部直接注射接种，茎基部直接浸泡接种及茎基部扎孔浸泡接种。结果发现，注射接种法死亡率大大降低，成活率统计结果为（78.3±6.2）%，而浸泡接种成活率为（20±4.08）%，扎孔浸泡接种成活率为（18.3±2.3）%。侵染3 d后对接种处的茎基部叶鞘和该植株的茎尖部位进行激光共聚焦观察，发现注射接种的方法和扎孔浸泡接种法均能在叶鞘中观察到大面积的侵染性菌丝，菌丝从叶鞘部位增殖到茎尖，再扩散到整个茎部。浸泡接种的方法，在接种3 d后茎基部叶鞘与茎尖切片均没有观察到明显的菌丝。由此可以得出结论，用菌液注射野生菰茎基部和扎孔浸泡茎基部的方法可以成功侵染野生菰。以上3种接种方法的植株孕茭率分别为（79.5±9.6）%，（47.7±10.9） %，0。但由于注射浸泡茎基部的方法植株成活率低（表4），因此可以筛选出注射茎基部的方法是有效的接种方法。