《表1 SSR引物:小滴玻璃化法超低温保存海岛棉XH33胚性细胞的研究》

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《小滴玻璃化法超低温保存海岛棉XH33胚性细胞的研究》


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根据贾莉莉等(2015)报道,选择可有效进行海岛棉种质资源遗传多样性分析的3对SSR引物(表1)。对上述基因组DNA进行PCR扩增,PCR反应体系:正反向引物(10 pmol/μL)各0.5μL,50 ng/μL基因组DNA 1μL,ddH2O 23μL,Mix 25μL;PCR反应程序为:95℃10 min;95℃30 s,60℃30 s,72℃30 s,35个循环;72℃10 min。扩增产物经非变性聚丙烯酰胺凝胶在100 V(60 mA)条件下电泳2 h进行分离;然后将凝胶置于0.2%硝酸银溶液浸泡20 min进行染色,以去离子水清洗;于0.4%甲醛溶液(含1.5%NaOH)中显色,去离子水洗涤,置于胶片灯上进行拍照。