《表1 Real‐time PCR基因引物序列》

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《运动对Keap1/Nrf2信号通路增强糖尿病大鼠心肌抗氧化能力的研究》

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5.RT‐PCR检测:采用Trizol提取总RNA，每个样本按照2μg RNA作为初始模板，配置20μl的总反应体系，应用c DNA合成试剂盒在核酸扩增仪（Gene Amp PCR System 9700，美国ABI公司）进行反转录成c DNA，反应条件为37℃，15 min；85℃，5 s；4℃保持。以合成的c DNA为模板，以β‐actin为内参，配置20μl反应体系，每个样本检测3个复孔，在实时荧光定量PCR系统（7300，美国ABI）进行扩增荧光定量，反应条件为预变性95℃，30 s；PCR反应95℃，5 s；60℃，31 s；共40个循环。荧光定量试剂盒为Ta Ka Ra公司的RR820A。根据收集的数据通过2-△△CT公式计算样本中m RNA的相对含量，其中△△CT=（CT实验组目的基因-CT实验组内参基因）-（CT对照组目的基因-CT对照组内参基因）。实验所需引物由上海生工生物合成。 （表1）