《表3 盲肠扁桃体免疫相关基因Real-time PCR引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《烟酰胺与丁酸钠对高密度笼养肉鸡肝脏和肠道氧化应激与炎症反应的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

肝脏、盲肠扁桃体RNA使用Trizol试剂（Ta Ka Ra，日本）进行提取，用核酸测定仪（Nano-drop2000）测定RNA的纯度和浓度。当OD260 nm/OD280 nm在1.8～2.0说明RNA质量较好，用于下一步试验。参照Ta Ka Ra Prime ScriptTM RT reagent Kit with g DNA Eraser（Perfect Real Time）（Ta Ka Ra，日本）反转录试剂盒说明将RNA反转录为c DNA。按照TB Green?Premix Ex TaqTM(Tli RNase H Plus）（RR420A，Ta Ka Ra，日本）说明书进行荧光定量PCR，反应仪器为7500荧光检测系统（Applied Biosystems），PCR反应条件：95℃预变性30 s后，进行95℃变性5 s，60℃复性34 s，40个循环反应。引物DNA由上海生工生物工程公司合成。PCR扩增完成后观察熔解曲线，并进行琼脂糖凝胶电泳鉴定扩增基因片段是否符合设计长度，验证扩增产物的特异性。肝脏抗氧化基因所用引物序列见表2，盲肠扁桃体免疫相关基因所用引物序列见表3，基因表达的结果采用2-??CT进行分析比较，以β-肌动蛋白（β-actin）作为参照基因校准。