《表1 Real-time PCR检测基因的引物序列》

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《奥沙利铂通过调控miRNA-7-5p/RAF-1促进胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究》

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待细胞单层占孔底的70%～80%时进行转染，8 h更换有血清培养液培养，24 h后收样，提取各组SGC-7901细胞miRNA，配置反转录反应液，反转录合成cDNA，配成20μl的稳定体系，37℃水浴锅孵育60 min，85℃加热5 s失活RT Enzyme Mix。采用Real-time PCR试剂盒，配置20μl的Real-time PCR反应体系，检测Ct值，利用2-ΔΔCt公式计算miR-7-5p的相对表达量，引物序列见表1。分别计算24、36、48 h miR-7-5p的相对表达量。实验重复三次。