《表1 Real-time PCR检测的引物序列》

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《血清miR-375及血液中靶基因在过敏性鼻炎患者治疗前后的表达变化及意义》

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分别以血液RNA和血清RNA为模板，参照购自美国赛默飞世尔科技（中国）有限公司（Thermo Fisher Scientific）的Taq-Man微小RNA反转录试剂盒（Taq-Man miRNA Reverse Transcription Kit）的说明合成第一链互补cDNA。MiR-375及其靶基因和炎症因子的引物序列（表1）由广州市锐博生物科技有限公司合成。miR-375的表达量分析以血清RNA反转录的cDNA为模板，并以U6小环RNA作为内参。靶基因的表达量分析以血液RNA反转录的cDNA为模板，并以三磷酸甘油醛脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）作为内参。利用购自日本东洋纺株式会社的SYBR Master Mix试剂盒在美国应用生物系统公司（Applied BioSystems）的ABI 7500 real-time PCR仪上对上述合成的cDNA进行real-time PCR检测。每个反应重复3次。结果采用2–ΔΔCt相对定量法[19]计算，ΔCt=Ct（目标基因）–Ct（内参基因）。