《表1 PCR和real time PCR引物序列》

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《外周血单个核细胞黑色素瘤缺乏因子2在原发性肝癌中的表达及其临床意义》

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EDTA抗凝管采集患者清晨空腹静脉血2ml，用以分离PBMCs；Ficoll液常规分离PBMCs；按Trizol说明书提取PBMCs中总RNA，75%乙醇洗涤RNA沉淀2次，按照逆转录试剂盒说明书合成cDNA，-80℃保存。根据Gene Bank检索的基因序列，利用Premier 6软件设计AIM2、GAPDH引物序列（表1），引物均由宝生物工程有限公司合成。Real time PCR扩增条件:95℃，30s，预变性；95℃，5s，60℃，30s，40个循环，定量分析；95℃，15s，60℃，1min，95℃，15s，1个循环，融解曲线分析。反应体系按real time PCR试剂盒说明书配制。经验证靶基因real time PCR扩增产物融解曲线集中且为单峰。