《表4 实时荧光定量扩增程序与熔解程序》

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实时荧光定量PCR在Life Technologies公司生产的ABI-7500 Fast Real-Time PCR仪器中进行,使用康为世纪公司Ultra SYBR Mixture(Low ROX)试剂盒,而后进行实时荧光定量的扩增(表4)。所有引物首先采用两步法qRT-PCR程序进行扩增并绘制扩增曲线,对扩增曲线结果不好的引物进一步采用三步法qRT-PCR程序扩增,最后通过熔解程序进行熔解曲线的绘制。