《表1 三类整合子中整合酶基因及可变区的引物序列》
IntⅠ1、2、3分别对应Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合子中5′-保守末端的整合酶基因,若其出现阳性表达,则代表对应整合子阳性
Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合子整合酶基因(分别为Int 1、2、3) PCR反应体系[4]为:2×Taq PCR MasterMix 12.5μL,其中包含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液等,上、下游引物各0.5μL(10ng/μL),DNA模板0.5μL(模板浓度10ng/μL),补充ddH2O至25.0μL;反应条件为:95℃预变性5min;94℃变性30s,62℃退火30s,72℃延伸1min,26个循环;72℃延伸5min。取5μL产物点样在2%琼脂糖凝胶中电泳60min,电压为80V,以100~1 200bp的MarkerⅡDNA Ladder作为参照,凝胶成像系统分析并处理结果。参照文献[4],Int 1、2、3及可变区所用的引物序列见表1。
图表编号 | XD0053822700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.08.28 |
作者 | 徐令清、黄圳婷、汤英贤、李玉珍、温伟洪、陈凌娟、王欢、李介华 |
绘制单位 | 广州医科大学附属第六医院、清远市人民医院检验科、广州医科大学附属第六医院、清远市人民医院检验科、广州医科大学附属第六医院、清远市人民医院检验科、广州医科大学附属第六医院、清远市人民医院检验科、广州医科大学附属第六医院、清远市人民医院检验科、广州医科大学附属第六医院、清远市人民医院检验科、广州医科大学附属第六医院、清远市人民医院检验科、广州医科大学附属第六医院、清远市人民医院检验科 |
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