《表2 Ⅰ类整合子和ISCR1的PCR引物序列》

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对于碳青霉烯基因阳性的菌株,使用PCR技术分别扩增Ⅰ类整合子和ISCR1的保守区,其中保守区阳性的菌株进一步扩增可变区并测序,从而分析其基因盒组成。PCR引物序列见表2,PCR反应总体系为20μL,保守区反应条件为:95℃预变性5 min;95℃变性15 s,57℃退火并延伸2 min,40个循环;72℃终延伸10 min。可变区反应条件为:95℃预变性5 min,95℃变性15 s,57℃退火并延伸4 min,35个循环;72℃终延伸10 min。阳性对照为测序并在Gen Bank数据库中blast比对确认的临床菌株。